Hycult Biotech—免疫组化,冰冻切片Protocol 免疫组织化学是通过特异性抗体染色来确定目标抗原在细胞或组织中的位置和分布。将抗体偶联到荧光或酶标记上,通过显微镜观察到的标记位置近似于目标抗原的位置。 大多数组织不能在显微镜下观察,因为它们太厚,光线无法透过。...
免疫酶组化技术是通过共价键将酶连接在抗体上,制成酶标抗体,再借酶对底物的特异催化作用,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,于普通显微镜或电镜下进行细胞表面及细胞内各种抗原成分的定位,根据酶标记的部位可将其分为直接法(一步法)、间接法(二步法)、桥联法(多步法)等,用于标记的抗体可以是用免疫...
免疫组化(Immunohistochemistry,IHC),是基于抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使结合抗体的显色剂显色来确定组织或细胞内的抗原,对其进行定位、定性及相对定量的研究,是生命科学研究中常用且重要的实验方法。 免疫组化的实验步骤虽然比较简单,但是贵在精通,重在认真,要在细节。不忘Protocol,方得Result!今天就让...
二、荧光免疫组化(以Tau蛋白抗体为例) 将制作的脑切片(本公众号《小鼠脑常规病理学检测(石蜡切片HE染色protocol)》)进行tau蛋白免疫荧光: 1)脱蜡和复水:二甲苯(Ⅰ)12 min→二甲苯(Ⅱ)12 min→100%乙醇(Ⅰ)3 min→100%乙醇(Ⅱ)3 min→95%乙醇3 min→90%乙醇3 min→80%乙醇3 min→70%乙醇3 min→蒸...
一、细胞爬片免疫组化技术路线 1.细胞爬片终止培养后,PBS洗2×2min(PBS可以不灭菌),细胞载片用4%的多聚甲醛(室温)40min—24h,PBS漂洗,3×5min; 2.1%Triton X-100 孵育 1次(室温)10 分钟,PBS漂洗,3×5min; 3.用3%H2O2去离子水室温孵育10分钟,以消除内源...
二、荧光免疫组化(以Tau蛋白抗体为例) 将制作的脑切片(本公众号《小鼠脑常规病理学检测(石蜡切片HE染色protocol)》)进行tau蛋白免疫荧光: 1)脱蜡和复水:二甲苯(Ⅰ)12 min→二甲苯(Ⅱ)12 min→100%乙醇(Ⅰ)3 min→100%乙醇(Ⅱ)3 min→95%乙醇3 min→90%乙醇3 min→80%乙醇3 min→70%乙醇3 min→...
免疫组化 protocol 方法与原理大全免疫组化(SP法) 第一天 (5h) 准备:60℃ 烘片2-4h 1.二甲苯脱蜡1 30min 2.二甲苯脱蜡2 30min 3.100% 乙醇 10min 2次 4.95% 乙醇 3min 5.85% 乙醇 3min 6.75% 乙醇 3min 7.ddH20 1min 2次 轻晃以防掉片 8.抗原修复: 使用1L烧杯,9ml 柠檬酸(0.1M现配)溶液...
免疫组化 protocol 方法与原理大全免疫组化(SP法) 第一天(5h) 准备:60℃烘片2-4h 1.二甲苯脱蜡1 30min 2.二甲苯脱蜡2 30min 3.100%乙醇10min 2次 4.95%乙醇3min 5.85%乙醇3min 6.75%乙醇3min 7.ddH20 1min 2次轻晃以防掉片 8.抗原修复: 使用1L烧杯,9ml柠檬酸(0.1M现配)溶液和41ml柠檬酸钠(0.1...
免疫组化protocol试剂:二甲苯酒精柠檬酸盐缓冲液(PH=6)—修复液:(第2步用到)储存液:A0.1M枸橼酸溶液:称取21.01g枸橼酸(C6H8O7²H2O)溶于1000ml蒸馏水中。B0.1M枸橼酸钠溶液:称取29.4g枸橼酸钠(C6H5Na3O7²2H2O)溶于1000ml蒸馏水中。工作液:区9mlA和41ml液加入450ml蒸馏水中,溶液PH值应该为6.0±...
一、细胞爬片免疫组化技术路线 1.细胞爬片终止培养后,PBS洗2×2min(PBS可以不灭菌),细胞载片用4%的多聚甲醛(室温)40min—24h,PBS漂洗,3×5min; 2.1%Triton X-100 孵育 1次(室温)10 分钟,PBS漂洗,3×5min; 3.用3%H2O2去离子水室温孵育10分钟,以消除内源性过氧化物酶活性;PBS漂洗,3×5min; ...