免疫组化正是利用这一特性,即先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来,以其作为抗原或半抗原去免疫小鼠等实验动物,制备特异性抗体,再用这种抗体(第一抗体)作为抗原去免疫动物制备第二抗体,并用某种酶(常用辣根过氧化物酶)或生物素等处理后再与前述抗原成分结合,将抗...
1)取出一张洗净的切片甩去组织切片上多余水分,用滤纸把组织周围的水分擦掉后,用免疫组化笔将组织圈起来(首尾要闭合,且不能画到组织上),以防抗体流出。 2)画好后放入装有蒸馏水中浸泡。 3)取出画好圈的组织切片,甩掉残余的水分,小心滴加封闭液覆盖组织,...
*将玻片放入装有抗原修复液的容器中,置微波炉加热至95℃以上,持续l0～15分钟,冷却后,按免疫组化染色步骤进行。 *此方法由于微波场内极性分子、离子高速运动,撞击交联的网链,使抗原异常的构想恢复正常,且因分子运动产热、效率高、时间短,对抗原再现效果好。 (4)高压加热法暴露抗原 *将玻片浸入抗原修复液内,置高...
1、免疫组织化学的概念: 免疫组化是利用抗原与特异性结合的原理,通过化学反应使标记的 显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗 原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组 织化学。免疫组化实验所用的有哪些?免疫组化实验中常用的抗体为单抗体和多抗体。单抗体是一个...
免疫组化的原理主要是利用抗体的高度特异性与抗原相结合,然后使用染色技术来显示抗原的位置。该技术的基本原理可分为抗原-抗体反应、信号放大和信号显示三个步骤。 第一步:抗原-抗体反应 免疫组化的第一步是选择合适的抗体,通过与目标蛋白质的特异性结合来形成抗原-抗体复合物。抗体可以是单克隆抗体或多克隆抗体。单...
其原理基于抗原与抗体之间的特异性结合。在进行免疫组化实验时,通常需经历如下步骤: 1.取样与制片:从待研究的组织或细胞中取得样本,并将其固定在载玻片或切片上,以便后续的实验处理。 2.抗原恢复:某些样本经过固定处理后,可能会造成抗原的损失或掩盖。因此,为了使抗原能更好地被抗体识别,常需要进行抗原恢复的步骤...
免疫组化原理和步骤免疫组化原理和步骤 实验原理: 抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性,免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原,通过免疫动物后获得特异性的抗体,再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的,因此还必须...
在免疫组化中,主要包括抗原修复、特异性抗体结合、信号放大、染色和显微镜观察等步骤。 第一步:抗原修复 抗原修复是为了提高抗原的可见性,常见的修复方法有热原修复和化学原修复。热原修复是将组织样本在热压下加热一段时间,以恢复被固定、变性或交联的抗原的活性。化学原修复是使用化学试剂改变组织中蛋白分子的结构,...