（4）洗涤 用10～30滴蒸馏水滴冲洗铜网膜，滤纸吸干。（5）负染 用2%醋酸双氧铀负染数秒，吸干。（6）电镜观察 凡抗原和抗体有反应，则在铜网膜上能捕获到较多的粒体。可以提高病毒检测效率10～100倍。本法适宜各种形状的病毒粒体。2 修饰法 （1）包被抗血清 铜网膜面覆于抗血清液滴上（抗血清...
因此,免疫电镜胶体金标记法近年来被成功地应用于生物学的各个方面,并取得了要喜的进展,解决了一些过去未能解决的问题,80年代以来似有取代免疫电镜 PAP技术的趋势。胶体金标记抗体技术在电镜水平应用有许多优点:首先,手续不如PAP法烦琐,不需用H2O2等损伤微细结构的处理步骤,对微细结构的影响较少。其次,金颗粒具有很高...
1.包埋前染色 包埋前染色即在进行常规电镜包埋处理前先行免疫组织化学染色,然后于解剖显微镜下将免疫反应阳性部位取出,修成2～4mm3大小的组织块,再按常规电镜方法处理,包括戊二醛的再固定、锇酸后固定、脱水、包埋、超薄切片和电镜观察等。如果特三性免疫反应的范围太小或只观察特定部位的免疫反应,为了准确定位,可做第...
免疫电镜操作方法免疫电镜样品制备方法 1固定,2%PFA+0.5%GA,pH7.4,4℃12 h 2室温PBS洗三次 3锇酸0.5%作用1h(4℃) 4室温PBS洗三次 5乙醇梯度脱水:30%,50%,70%,80%,90%,100%(2-3次),100%丙酮(2-3次)。每个梯度每个浓度10 min 6渗透:100%环氧丙烷3次,每次10 min。接着依次为1:1(环氧丙烷:812...
铁蛋白免疫电镜技术的操作方法主要包括以下几个阶段：一、铁蛋白的提取 配制溶液：配制硫酸铵液并调整至pH5.85，加入铁蛋白使其浓度为2%。 添加硫酸镉：加入20%硫酸镉至最终浓度为5%，混匀后于4℃过夜。 离心与沉淀：进行离心去除上清，重新加入硫酸铵并重复离心步骤，直至得到典型的黄褐色结晶结构。
铁蛋白的提取是铁蛋白免疫电镜技术中的关键步骤，其过程分为以下几个阶段：- 配制硫酸铵液，并调整至pH5.85，1g铁蛋白加入100ml液中，确保溶液浓度为2%。- 添加20%硫酸镉，使最终浓度为5%，并充分混匀，于4℃条件下过夜。- 进行1500g离心2小时，去除上清液。然后重新加入2%硫酸铵，混匀，再次离心...
4. **超薄切片(D)**:电镜观察必需的超薄切片(50-100nm),需通过超薄切片机制作,结合免疫标记技术(如胶体金标记),可保留抗原活性和超微结构,为免疫电镜首选。 5. **石蜡切片法(E)**:组织经高温脱水、透明和石蜡包埋,破坏抗原和超微结构,仅用于常规光镜。 综上,**超薄切片(D)**是唯一符合免疫电镜高分辨率...
本发明涉及生物装置领域,具体涉及一种生物组织免疫电镜标记的方法。 背景技术: 1、电镜是获得生物样本(细胞、组织等)中超微结构(纳米及亚纳米尺度)信息的最主要技术。免疫电镜则是将免疫标记技术与电镜成像技术相结合,通过抗体与生物样本中抗原的免疫反应,能提供特定分子(蛋白等)在超微结构中原位的位置信息,在生命科学...
immunoelectron microscopy (免疫电镜):将抗体进行特殊标记后用电子显微镜观察免疫反应的结果.。根据标记方法的不同,免疫电镜技术可分为免疫铁蛋白技
合后的标本,常规电镜样本切片. 4.TG免疫电镜胶体金标记法:聚合块修块后,先切半薄切片 1m,定位于滤泡上皮,然后超薄切片,捞于无膜镍网上,染色程 序同既往报道一.主要步骤:TG一抗浓度分别为即用型工作液及 1:25,1:5O,1:100,1:200稀释度,4℃冰箱24h;对照组用 ...