二、免疫化学法分为单向免疫扩散、火箭免疫电泳、透射比浊法和散射比浊法。后两种方法可通过仪器对补体的C3、C4、B因子等单个成分进行自动化测定。待测血清标本中的C3、C4成分,经适当稀释后与相应抗体反应形成复合物,反应介质中的PEG可使该复合物沉淀,仪器对复合物产生的光散射或透射信号进行自动检测,并换算
免疫组织化学常用方法大全.pdf
- **(D) CH50**:补体总活性测定方法,通过补体介导的溶血反应评估功能活性,依据补体系统作用机理,属于功能学检测,非直接抗原/抗体分析,不属于免疫化学法。 - **(E) 透射比浊法**:通过测量抗原-抗体复合物对透射光的衰减程度定量,属免疫化学法。 **结论**:D(CH50)与抗原-抗体反应无直接关联,故为正确选项。
下面介绍IHC方法的原理和常用的技术流程。 1.原理 IHC方法的核心是利用抗体与其特异性抗原之间的反应来检测组织切片中的分子结构。抗原可是蛋白质、多糖、脂质等生物大分子,而抗体则是人工制备的、具有特异性结构的免疫球蛋白。 IHC方法涉及到两种类型的抗体:第一抗体和第二抗体。第一抗体通常是一种单克隆或多克隆...
1971 年,Faulk 和Taylor 首先将兔抗沙门氏菌抗血清与胶体金颗粒结合,用直接免疫细胞化学技术检测沙门氏菌的表面抗原。胶体金技术逐渐得到完善和成熟,应用胶体金为标记物的免疫金染色(IGS )与免疫金银染色(IGSS )方法在光镜和电镜下可以单标记和双标记或多种标记同时观察...
酶标记的称为酶标免疫法(enzyme-labeled antibody method),常用的酶有辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase),酶与底物发生反应后形成不透明的沉积物,从而显示出抗原存在的部位。 抗体与抗原的结合方法可分为直接法和间接法两种,直接法是将带有标记的抗体与抗原反应,显示出抗原存在的部位。而间接法则是在抗体抗原初级...
1. 免疫组化染色(Immunohistochemistry, IHC):免疫组化染色是免疫组织化学中最常用的方法之一、其基本原理是使用一种与目标抗原特异性结合的抗体,将抗原与抗体结合,然后通过染色方法将表达该抗原的细胞或组织可视化。常用的染色剂包括多聚酶、酶标、荧光素和放射性同位素。IHC可以用于检测细胞表面抗原、细胞器中的抗原...
按照常规操作,要用酶显色的免疫组织化学技术同时检测4种抗原,难度很大。但是,可借助石蜡切片结构精度高的优势,通过邻片叠加的方法来实现。基本原理是:以3 ~ 5 μm厚度制作连续石蜡切片,取相邻的两张断面,在两张断面上分别进行双重标记;采图后将两个断面的图像重叠在一起。由于相邻断面本来就能彼此对合,因此重叠...
一、免疫组化技术的基本知识 抗体与抗原能特异性结合—生物学结合是免疫球蛋白Ig 抗原两个主要属性:免疫原性及特异反应性,蛋白质具有抗原性 免疫球蛋白的化学结构 ❖免疫球蛋白根据重链结构命名IgG(γ),IgA(α),IgD(δ),IgE(ε),IgM(μ)❖五种免疫球蛋白只有两种类型的轻链,即:Kappa(κ)和Lambda(λ)...