2. 掌握通过克隆化培养筛选出单克隆细胞的方法。 3. 提高对细胞培养技术在实际科研中的应用认识。 二、实验原理 克隆化培养是指将单个细胞或少量细胞进行分离培养,使其繁殖成一群具有相同遗传特征的细胞群体。在细胞生物学和分子生物学研究中,克隆化培养是获取纯种细胞、研究细胞生物学特性、进行基因工程等的重要技术...
e. 每天用倒置显微镜观察克隆生长情况,选择只有一个集落生长的孔,弃掉两个以上和没有细胞生长的孔。f. 克隆大量繁殖后,布满孔底的1/3~1/2时,测培养液抗体。g. 抗体阳性孔细胞,移到有饲养层的组织培养瓶中,并传2~4代就可以脱离饲养细胞,建成克隆株。2. 软琼脂克隆化 借助撒在软琼脂上单个细胞定位...
目的:通过对恒河猴骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells from bone marrow of Rhesus monkey, RhBMSCs)进行单克 隆培养,以获得单克隆RhBMSCs,并进行生物学特性分析。方法:①采用密度梯度离心和贴壁法分离培养原代RhBMSCs,原代RhBMSCs消化后经双层软琼脂克隆培养法获得单个细胞克隆球,将克隆球挑出进行扩增培养:...
转化体在固体选择性培养基中于37℃培养生长过夜,一般在16小时以上。每个转化体即长成一个清楚可见的克隆。数出克隆数并计算出转化效率。
骨髓基质干细胞的单克隆化培养和多向分化的实验研究 维普资讯 http://www.cqvip.com
原因很多:1.培养基的问题。用确定可以长起来得菌测试一下,可以很快知道是否有问题。2.确认抗性是否正确。3.最可能的问题是连接转化失败,这个问题也最难解决,涉及的小问题更多。先确认试验设计没有问题,再确认酶切是否有问题,然后再确认连接过程是否符合规定。4.如果确认上述问题都没有,那就是另一...
#实验室日常 #培养基 #菌落培养 #克隆实验 #质粒转化 博迈德测序合成试剂 11 0 01:05 博迈德的DH5a,DH5a-,DH5a-T1有啥区别?#实验室日常#感受态#克隆感受态#大肠杆菌#表达感受态#农杆菌 博迈德测序合成试剂 4 0 00:15 实验室模拟工业制光气 八氟化氖NE的实验室 2714 1 00:58 感受态细胞可以保存...
(1)要获取iPS细胞,首先要进行黑鼠体细胞体外培养。为了方便实验开展,可以对黑鼠组织用胰蛋白酶处理,其目的是消化组织中的胶原纤维,以获得单个细胞的悬浮液。然后通过克隆化培养得到纯系的细胞群。 (2)图中2―细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管(或子宫角)内获得,进行体外培养至囊胚后,将其制成重组囊胚。重组囊胚移植...
细胞平板克隆形成实验培养基要加双抗吗网友 1 最佳答案 回答者:网友 可以不加,有时候加了会有拮抗作用。1)24孔板内以5~8x104cells/孔的密度铺板,铺足够量的孔以进行后续的梯度实验。细胞孵育过夜;(2)准备筛选培养基-含不同浓度嘌呤霉素的新鲜培养基(如0-15μg/mL,至少5个梯度);(3)细胞孵育过夜后加入筛...
a这种免疫细胞用过克隆化,成为但克隆系(单一纯化的无性繁殖系),就能产生大量单一类型的高纯度抗体。这种抗体叫做“但克隆抗体”。如果把杂交细胞在种入动物体内,就可以从动物体内抽出单克隆抗体的体液。把这种细胞在外培养,可以供实验研究和临床研究。 This kind of immune cell has used the cloning, but becomes...