1. 转染后24-48h可收获细胞，加入适量RIPA细胞裂解缓冲液（含蛋白酶抑制剂），冰上裂解30min，细胞裂...
做co-IP时，细胞裂解30min离心后，最上层有白色的一层物质，这个白色物质是什么？我用beads孵育过夜后...
准备蛋白样品--抗原抗体结合--proteinA/G与抗体结合--免疫共沉淀分离--WB/MS分析 出报告 结果如下 ...
五天跟着师兄养细胞 做了co-IP 跑了WB qPCR 提了RNA 质粒 奇怪的是我天天跟着他 但怎么现在想起他 脑子里没有他的脸呢。。。而且每天早上刚见到他的时候就像见到一个陌生人。。。 2长沙·中南大学湘雅医学院(老校区) 长沙·中南大学湘雅医学院(老校区) 湘雅路87号(文昌阁地铁站4号口.....
我用加了GFP或者Myc标签的表达质粒表达蛋白,然后做CO-IP! 用抗GFP抗体将复合物拉下来可以不? GFP会不会和细胞内其他蛋白相互作用也形成复合物而影响结果啊? 我表达的目的蛋白是想筛选相互作用蛋白,通过把GFP拉下来,GFP连接了我的表达蛋白A,蛋白A可以把未知的蛋白X一起拉下来么? 加了GFP的会不会影响蛋白A的结...
做co-IP时，细胞裂解30min离心后，最上层有白色的一层物质，这个白色物质是什么？我用beads孵育过夜后...
1Co-IP原理免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。原理:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质 -蛋白质间的相互作用被保...
我用加了GFP或者Myc标签的表达质粒表达蛋白,然后做CO-IP!用抗GFP抗体将复合物拉下来可以不?GFP会不会和细胞内其他蛋白相互作用也形成复合物而影响结果啊?我表达的目的蛋白是想筛选相互作用蛋白,通过把GFP拉下来,GFP连接了我的表达蛋白A,蛋白A可以把未知的蛋白X一起拉下来么?
是的，过表达的Co-IP细胞样品收了之后可以冻存于 -80°C，之后仍然可以进行 Co-IP 实验。以下是冻...
过表达的Co-IP（共免疫沉淀）实验样品在细胞收集后是否可以冷冻保存（-80℃）取决于实验的具体要求和...