在本领域中包含人源il-6基因的转基因小鼠是已知存在的。然而,人源il-6转基因在小鼠基因组中的随机插入导致了所述人源il-6的蛋白表达调控性较差,表现在这类转基因小鼠的很多病理症状,包括但不限于,浆细胞增生和肾小球肾炎。因此,这些小鼠的应用有局限性。 人们需要表达人源或人源化il-6和/或人源或人源化il...
检测IL-6抗体蛋白需要使用抗原—抗体分子杂交技术。 (5)规模化生产前通常需进行抗体的表达剂量和活性检测。使用PCR检测基因X 中是否插入neo基因设计引物时至少一侧是根据neo基因设计,这样才能保证成功敲除的基因X 能扩增,而未敲除的基因X 不能扩增。 反馈 收藏 ...
产品名称:pECMV-3×Flag-IL6人源基因哺乳表达质粒 产品规格:1μg质粒干粉 供应商:上海古朵 原质粒分类: 基因文库质粒(ORF表达质粒、人源哺乳细胞表达质粒) 筛选标记:遗传霉素G418 原核抗性:氨苄青霉素Amp 克隆菌株: 大肠杆菌DH5α 5'测序引物: M13F
(1)若利用化学方法合成rhIL-6基因,通常需先根据IL-6的___设计出rhIL-6的基因序列,在设计时,还要尽可能依据___细胞偏好的密码子。在利用PCR扩增rhIL-6基因时,为提高引物与模板结合的效率,设计引物需避免两个引物或1个引物不同区段的碱基序列___。在构建重组质粒时,要选择在宿主菌中___水平高的质粒作为载体...
偏差仅出现在N端引物区中(见表1)。在可变重链的情形中, 序列变体QVQLKQ(SEQ ID No:59)在引物区出现9次,但其它变异仅出现一次或两次。选择该变体用于进行亚克隆。在可变轻链的情形中,两种变体以相等比例存在。在所述序列与鼠种系序列进行比较后,仅具有 3 个突变的 cr1 序列展示出与所鉴定的VL序列很大的同源...
(SEQ ID NO:2);上游探针,FAM-AACGTCCTCA CAGCAACGA-MGB(SEQ ID NO:3);下游正向引物,GTGCCCAGGT GTGCTCATG(SEQ ID NO:4);下游反向引物,CGCCTGCCTC CTCACTTTAT C(SEQ ID NO:5);下游探针,FAM-ATCTGCTTCA CCATCCACT-MGB(SEQ ID NO:6);其中FAM指5'羧基荧光素荧光探针,并且BHQ指黑洞淬灭型荧光淬灭...
图22:IL-4Rα小鼠人源化F1代鼠尾PCR鉴定结果,其中,图(A)使用引物对Flp-F2和Flp-R2用以确认Flp片段的存在;图(B)使用引物对Frt-F2和Frt-R2用以扩增neo片段以验证抗性片段是否去除;其中,M为Marker,WT为野生型,+为阳性对照,H 2 O为水对照; 图23:流式分析结果,其中,取野生型C57BL/6小鼠(图A、B、D、...
五种重组人源IL-18突变子表达质粒的构建及其在BxPC-3细胞中的表达
卜下游引物(10¨M) 模板(DNA) TaqDNA聚合酶 MgCl。 DHX去离子水至总体积 PCR反应过程 IL一2的扩增反应过程 步骤一 步骤二 步骤三 第一轮 94℃×5min 59℃×45S 72℃×1min 第二轮 94℃×lmii3 59℃×45s 72℃×1mjn 第三轮 94℃×lmin 59℃×45S 72℃×7mjIG ...
使用以下引物:小鼠hprt正向:5’-agggatttgaatcacgtttg-3’(seqidno:7)、小鼠hprt反向:5’-tttactggcaacatcaacag-3’(seqidno:8);人il15正向:5’-gcccagggaaatcaaaagat-3’(seqidno:9)、人il15反向:5’-tggctccaacaaatcaacag-3’(seqidno:10)。使用比较阈值循环法计算相对表达值,并且相对于小鼠...