所有五种同工酶的测定方法，首先采用琼脂凝胶电泳法将这些同工酶分离开，然后，进行区带显影，即取另一条含L-乳酸，NAD，PMS以及四唑盐的凝胶薄片进行显影。用UF100型Vitatron光度计于546nm处对凝胶上酶活性区带进行扫描检测。按照试剂盒测定方法，使用脲作指示剂，能使肝源型LDH与心源型LDH区别分开。肝源型 LD...
下面就让我们一起来了解一下乳酸脱氢酶测定方法吧。 方法: 实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。 1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液1...
(一)材料 1.96孔培养板培养的待测细胞和对照细胞培养上清液。 2.0.1mol/L甘氨酸缓冲液、甘油酸7.505g、NaCl 5.85g,溶于双蒸水至1000ml。 3.缓冲基质液(pH 10.O):70%乳酸钠溶液10ml,0.1mol/L甘氨酸缓冲液125ml,0.1mol/L NaOH 75ml,4℃保存备用。 4.辅酶I溶液:辅酶I 10mg溶于2ml双蒸水中,4℃保存备用。
(1)将产生乳酸脱氢酶的海洋微生物进行6～10次活化,再经过定向驯化4～6次,使其在培养条件下生长良好; (2)按常规方法将定向驯化后的乳酸脱氢酶产生菌在12～18℃培养24～36h而后按5～8%的接种量进行逐级扩大培养,制备成液体一级种子和二级种子; (3)将液体一级种子或二级种子,按发酵液体积的4～10%接种量接入...
2.LDH从细胞内被释放到培养基中,形成了一个可视化的颜色反应。加样反应显色之后,用酶标仪进行检测,读数便捷; 3.样本和反应器材易得:仅需要取得200 μL细胞培养上清作为样本,进行后续检测。普通96孔板就可以完成。 对于乳酸脱氢酶的搭配使用,为了帮助检测到更多的细胞状态指标,更加全面的评估外界刺激对细胞的影响,Ab...
LDH乳酸脱氢酶细胞毒性检测 LDH释放检测 方法: a.根据细胞的大小和生长速度将适量细胞接种到96孔细胞培养板中,使待检测时细胞密度不超过80-90%满. b。吸去培养液,用PBS液洗涤一次。换新鲜培养液(推荐使用含1%血清的低血清培养液或适当的无血清培养液),将各培养孔分成如下几组:包括无细胞的培养液孔(背景空白...
细胞系活性检测方法之乳酸脱氢酶(LDH)释放法 LDH是活细胞浆内酶,当细胞损伤,细胞膜通透性变化时,会将LDH释放到培养液中。因此培养液中该酶的活性与被裂解的细胞系数量成正比。由LDH催化的酶促反应在催化乳酸生成丙酮酸的过程中使氧化型辅酶I(NAD)变成还原型辅酶I(NADH+H),后者再通过递氢体一吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS...
LDH乳酸脱氢酶细胞毒性检测之阳早格格创做 LDH释搁检测 要领: a. 根据细胞的大小战死少速度将适量细胞交种到96孔细胞培植板中,使待检测时细胞稀度没有超出80-90%谦. b. 吸来培植液,用PBS液洗涤一次.换新陈培植液(推荐使用含1%血浑的矮血浑培植液或者适合的无血浑培植液),将各培植孔分成如下几组:包罗无...
1、两种不同方法检测乳酸脱氢酶的可比性分析何柳,郭景玉,贺先奇(解放军第316医院检验科,北京100093)中图分类号R446(文飆标识码B 文章编号1002 - 2376 ( 2012 ) 03 - 0021 -02摘要目的:比较两种不同方法测定乳酸脱氢醉(LDH)结果的相关性。方法:选取一组标本同时 利用两种方法测定乳酸脱氢酶,对结果进行比校。
两种不同方法检测乳酸脱氢酶的可比性分析