D. 二倍体积的乙醇E. 三倍体积的乙醇 相关知识点: 试题来源: 解析 D 乙醇沉淀DNA时,通常通过加入2倍体积的乙醇来使溶液中的乙醇浓度达到约70%(假设原液中含一定浓度的盐)。该浓度的乙醇可使DNA脱水并降低其溶解度,从而促使沉淀形成。分析选项: - **A. 10%体积的乙醇**:乙醇浓度过低,无法有效沉淀DNA。
乙酸钠沉淀法:将DNA样品加ddH2O至100微升,再加入100微升酚:氯仿,13000r/min室温离心15min。转移上清至另一干净管中,加等体积氯仿,13000r/min离心10min。转移上清,并加1/10体积NaAc(3mol/L),再加2.5倍体积乙醇(EtOH,100%浓度),-20°C冷冻2h。13000r/min离心30min,弃上清,用70%乙醇润洗,13000r/min离心10m...
乙醇是首选方法,以下是具体步骤:1️⃣ 估算DNA溶液的体积。 2️⃣ 如果DNA溶液含有高浓度的盐,可以通过pH8.0的TE缓冲液来稀释,或加入适量的盐溶液。 3️⃣ 充分混匀溶液,加入2倍体积的95%冰乙醇,静置于冰上,让DNA沉淀形成。通常15-30分钟足够,但当DNA片段很小或含量很少时,需延长时间并加入MgCl2。
DNA乙醇沉淀法是一种常用的分离DNA的方法,其步骤如下: 1.在最多体积450μl的DNA样品中加入1/10体积pH4.2的3 mol/L NaAc,并快速颠倒以混匀。 2.加入2倍体积的95%乙醇或无水乙醇,并充分混匀。 3.将样品置于冷环境中沉淀,如-20℃过夜,或-70℃30 min,或干冰中5min。使用干冰进行乙醇沉淀时,可用锤子将干...
乙醇沉淀DNA的主要原理涉及两方面: 1. **电荷中和**:DNA磷酸骨架带负电,溶液中阳离子(如Na⁺)中和其电荷,减少分子间排斥力。 2. **溶解度降低**:乙醇加入后降低溶液极性(介电常数减小),削弱DNA与水分子的相互作用,其水化层被破坏,导致溶解度急剧下降。低温(如-20℃)进一步促进DNA析出。此过程需盐离子(如...
解析 乙醇使 DNA分子脱水 乙醇沉淀DNA的主要原理是高浓度乙醇破坏了DNA的水化层,使DNA分子脱水,同时中和其电荷,导致DNA溶解度降低而沉淀。在Na+等阳离子存在时,DNA的磷酸骨架负电荷被中和,分子间斥力减少,更易聚集。脱水后,DNA从溶液中析出,通过离心可收集沉淀。因此题目中的描述是正确的,完整陈述了关键机理。
总之,乙醇沉淀DNA的原理是基于DNA在低浓度盐溶液中容易沉淀的性质。通过控制溶液中的盐浓度和乙醇浓度,可以将DNA从溶液中沉淀下来,从而实现DNA的纯化。该方法具有操作简便、成本低廉等优点,是常用的DNA纯化技术之一。然而,乙醇沉淀法并不能完全去除所有杂质,因此在某些高纯度要求的应用中,还需要结合其他纯化技术...
乙醇沉淀DNA的原理: 🔷降低溶液极性,消除水化层: DNA分子在水溶液中,其磷酸基团周围会围绕一层水分子,形成水化层。乙醇的极性小于水,当乙醇加入DNA溶液后,乙醇分子会取代部分水分子,消除DNA分子的水化层。 🔷降低电荷排斥: DNA分子带有负电荷,在水溶液中由于静电排斥作用,DNA分子之间会保持一定的距离。乙醇的...
其原理基于DNA在乙醇中的溶解性与乙醇浓度相关,通过调节盐和乙醇的浓度,可以使DNA因为与溶液中DNA结合离解剂(一般是乙酸钠或其它金属盐,如NaCl)反应生成力矩强大的结合剂,从而使其沉淀到液体底部。 下面是乙醇沉淀DNA的详细步骤: 1.提取DNA溶液制备:首先,通过DNA提取方法从生物学样品(如细胞、组织等)中提取DNA。
为什么用无水乙醇沉淀DNA?相关知识点: 试题来源: 解析 1.DNA不溶于乙醇2.乙醇可以吸附水分子(极性相同),使得溶液中相对的水分子减少,增大了DNA在水中的相对浓度.3.附:乙醇沉淀DNA需要盐离子,用金属离子屏蔽DNA上磷酸的负电荷,降低DNA分子间的斥力,才能沉淀完全.结果...