串联亲和纯化质谱(TAP MS)技术采用两轮纯化的方法调取诱饵蛋白及其互作蛋白复合体。首先,在目的细胞中过表达带有TST-Flag双标签的诱饵蛋白;样本经裂解后,先与Streptactin树脂孵育、初次洗涤及洗脱,得到首次纯化的蛋白复合物;再将此蛋白复合物与anti-Flag树脂结合、再次洗涤及洗脱,得到第二轮纯化的蛋白复合物;最后,质谱鉴...
该技术首先利用亲和纯化技术从混合物中富集目标蛋白质及其结合伴侣,然后通过偶联质谱技术对富集物进行分析,鉴定蛋白质相互作用和确定复合物组成。 此技术的优点在于,能够对复杂的蛋白质混合物进行高效、准确的筛选,同时能够以较高的灵敏度和特异性检测出蛋白质相互作用。与传统的亲和纯化和质谱分析相比,串联亲和纯化偶联...
TAP/MS 串联亲和纯化/质谱供应商: 广州辉骏生物科技股份有限公司 联系人: 刘先生 地址: 广东广州市详细信息实验目的:寻找靶蛋白的互作蛋白 TAP/MS服务简介-辉骏生物TAP/MS是Co-IP/MS的“近亲”,两者在寻找诱饵蛋白的互作蛋白以及纯化互作蛋白的原理方面非常相似。但是TAP/MS在常规Co-IP的基础上引入了2个标签(...
经过特异性的两步亲和纯化,在生理条件下与目标蛋白发生真实作用的蛋白便可被一起洗脱下来,然后用质谱技术或Edman降解法对得到的蛋白质复合体进行鉴定。反馈 收藏
近年来,串联亲和纯化偶联质谱技术(AP-MS)已成为生物学研究中不可或缺的工具。该技术使用亲和纯化将蛋白质复合物从细胞或组织中分离出来,并使用质谱技术识别和定量这些复合物中的蛋白质。AP-MS技术的主要优势在于它能够鉴定蛋白质复合物中的成员和相互作用伙伴,同时还能够确定它们之间的结构和功能。然而,AP-MS技术在...
服务简介:TAP/MS是由Co-IP/MS以及GST Pull down-MS发展而来,三者在寻找鉴定目标蛋白的相互作用蛋白的原理以及方法上非常相似,流程以及效果都要优于酵母双杂交方法。但是,TAP/MS方法经过两步亲和纯化,而Co-IP/MS以及GST Pull down-MS都只是一步亲和纯化,所以TAP/MS相…
TAP-MS串联亲和纯化质谱实验技术服务,过表达TST-Flag双标签融合蛋白的细胞,经裂解后先与Streptactin珠子孵育、初次洗涤及洗脱,释放出蛋白复合物。,广州辉骏生物科技股份有限公司
TAP/MS是由Co-IP/MS以及GST Pull down-MS发展而来,三者在寻找鉴定目标蛋白的相互作用蛋白的原理以及方法上非常相似,流程以及效果都要优于酵母双杂交方法。但是,TAP/MS方法经过两步亲和纯化,而Co-IP/MS以及GST Pull down-MS都只是一步亲和纯化,所以TAP/MS相比可以有效减少非特异性蛋白的结合,假阳性率更低。
进一步的Western blot证实,所标记的TAP蛋白呈正常表达,经过两步串联亲和纯化后,蛋白银染色结果证实所纯化的蛋白样品以高纯度蛋白复合物形式存在.结合最新的质谱分析技术,我们在正常生理水平上对上述三种蛋白复合物进行蛋白质组学分析,研究不...
采用串联亲和纯化结合质谱分析,分离,鉴定与NLK结合的蛋白.结果 构建的pMSCVpuro/N-Flag-Strep-RFP和pMSCVpuro/N-Flag-Strep-NLK质粒经酶切鉴定,测序证明质粒构建 正确,pMSCVpuro/N-Flag-Strep-NLK155M质粒经测序证明构建正确.携带上述基因的反转录病毒感染的HCT-116细 胞,Flag-Strep-RFP,Flag-Strep-NLK和Flag-...