其原理是利用特定的亲和配体与目标蛋白质发生特异性结合,从而实现目标蛋白质的高效分离和纯化。本文将详细介绍串联亲和纯化技术的原理及其在生物制药和生物学研究中的应用。 一、串联亲和纯化技术的基本原理 1. 亲和配体的选择 串联亲和纯化技术的第一步是选择适合的亲和配体。亲和配体是一种能够与目标蛋白质特异性结合...
利用串联亲和纯化检测蛋白质间相互作用的原理是在靶蛋白质一端嵌入一个特殊的蛋白标签(TAP tag),不破坏靶蛋白质调控序列。将构建好的靶蛋白质粒转入靶细胞内进行表达,如果靶细胞内存在相互作用蛋白,则会与靶蛋白结合形成蛋白复合物。利用TAP标签进行两步连续的亲和纯化获得接近天然条件的靶蛋白复合物。随后用质谱等技术...