串联亲和纯化质谱(TAP MS)技术采用两轮纯化的方法调取诱饵蛋白及其互作蛋白复合体。首先,在目的细胞中过表达带有TST-Flag双标签的诱饵蛋白;样本经裂解后,先与Streptactin树脂孵育、初次洗涤及洗脱,得到首次纯化的蛋白复合物;再将此蛋白复合物与anti-Flag树脂结合、再次洗涤及洗脱,得到第二轮纯化的蛋白复合物;最后,质谱鉴...
目的 利用串联亲和纯化结合质谱分析分离和鉴定与蛋白激酶NLK结合的蛋白复合物组分.方法 将RFP,NLK和其突变体NLKK155M克隆至本室改造的带有Flag和Strep双标签的反转录病毒载体pMSCVpuro中,通过酶切鉴定并测序 验证其构建的正确性.采用反转录病毒感染结合嘌呤霉素筛选的方法,获得稳定表达RFP,NLK,NLK突变体NLKK155M的HCT...
目的采用RNA干扰技术下调DJ-1基因在肺鳞癌细胞HTB-182中的表达,采用串联亲和纯化质谱(TAP-MS)技术寻找DJ-1在HTB-182细胞系中的相互作用蛋白.方法构建靶向DJ-1基因siRNA慢病毒载体,感染HTB-182细胞(DJ-1 siRNA组),并设立慢病毒载体对照组(Control siRNA组)及空白对照组,采用Western blot法检测DJ-1蛋白表达水平,建...
下列技术中哪项经常用于检测基因转录调控A.染色质免疫沉淀技术B.免疫共沉淀技术C.酵母双杂交技术D.串联亲和纯化——质谱分析技术
下列技术中哪项经常用于检测全基因组基因转录调控A.染色质免疫沉淀技术B.免疫共沉淀技术C.酵母双杂交技术D.串联亲和纯化-质谱分析技术搜索 题目 下列技术中哪项经常用于检测全基因组基因转录调控 A.染色质免疫沉淀技术B.免疫共沉淀技术C.酵母双杂交技术D.串联亲和纯化-质谱分析技术 答案 A 解析...
蛋白质互作检测技术包括( )A.免疫共沉淀技术B.酵母双杂交技术C.串联亲和纯化-质谱分析技术D.遗传互作检测技术E.蛋白质互作预测技术
哪种蛋白质互作检测技术的结果最可靠A.免疫共沉淀技术B.酵母双杂交技术C.串联亲和纯化-质谱分析技术D.计算机预测技术
哪种蛋白质互作检测技术的结果最可靠A免疫共沉淀技术B酵母双杂交技术C串联亲和纯化质谱分析技术的正确答案和题目解析