本发明公开了一种快速构建丝状真菌表达载体的方法,主要过程为:分别克隆酵母质粒复制模块,细菌质粒复制模块,丝状真菌复制模块及其相应的启动子序列,各片段间具有首尾相连接的同源臂约2050 bp,采用电转化技术得到含有三模块的质粒,该质粒可用于非模式丝状真菌自身启动子强弱的快速鉴定,关键酶基因表达,次级代谢产物生物合成,...
法律状态 1999-09-29 专利申请的视为撤回;1998-08-19 公布 摘要 本发明公开了一类可以在丝状真菌中独立自主复制的穿梭载体质粒及其在表达外源基因中的应用。本发明的载体质粒包括的主要功能片段有:a)牛的乳头瘤病毒(BPV)片段;b)丝状真菌的外源生物启动子;c)pBR322质粒的PvuII和BamHI片段。新闻...
4.一种用丝状真菌表达系统生产多肽的方法,包括用权利要求1所述的独立 自主复制的穿梭载体质粒在丝状真菌中表达所述的多肽基因。 5.根据权利要求4的方法,其中的宿主菌是丝状真菌。 6.根据权利要求4或6的方法,其中的启动子为MT、SV40或35S启动子。 7.根据权利要求4的方法,其中被表达的基因是与丝状真菌异源的任何...
因此,研究米曲霉酶的生产及表达机制对于促进生物工程领域的发展和应用具有重要的意义。 二、研究内容及方法 1.宿主菌的筛选:通过对多种可作为丝状真菌米曲霉宿主菌的筛选和评价,确定适合种类的宿主菌。 2.构建表达载体:设计合适的表达载体,并在适合宿主菌的基础上,构建稳定的表达载体。 3.体外转染宿主菌:将构建的...
推测的分子量为45 541.01 u,等电点pI为6.05.BLAST分析表明,该cDNA序列与其它已登录的SAD基因cDNA序列一致性最高可达93.1%;编码的氨基酸蛋白序列性一致最高为89%.同时,构建了由构巢曲霉3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的gpd A启动子驱动的丝状真菌表达载体,通过冻融法转入农杆菌中,PCR鉴定表明,pBAR-SAD已转入农杆菌EHA...
Host宿主:丝状真菌 Function用途:蛋白表达 Insert Gene Species片段物种: Insert/Gene Type:ORF Bacterial resistance原核抗性:Kan Selection Marker真核筛选标记:Hyg Reporter荧光报告基因:Gus Map & Sequence图谱与序列:Contact BioVector NTCC Inc. 供应商:BioVector NTCC质粒载体菌株细胞蛋白抗体基因保藏中心 ...
各位做过丝状真菌基因敲除的大神们,小白刚开始做基因敲除,特跪求一个载体。望不吝赐一个 发自小木虫...
题目黑曲霉是一种丝状真菌,其代谢产物广泛应用于食品加工等领域。回答下列问题:(1)黑曲霉的PDA液体产酶培养基组成为:麸皮、豆粉饼、(NH4)2SO4、MgSO4•7H2O、KH2PO4,培养时需要通气振荡,由此可知黑曲霉的代谢类型为 异养需氧型;豆粉饼可提供黑曲霉生长所需的 碳源和氮源;若要分离黑曲...
【题目】天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类,用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用.研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转入酿酒酵母菌,获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精.请回答下列问题: (1)将淀粉酶基因切割下来所用的工具是 ,用 将淀粉酶基因与载体拼接成新的DNA分子,此表达...
丝状真菌表达载体以发育中的千年桐种子总RNA为模板,通过RT-PCR方法扩增得到硬脂酰脱饱和酶基因SAD的cDNA序列.该序列长度为1 191 bp,编码396个氨基酸.推测的分子量为45 541.01 u,等电点pI为6.05.BLAST分析表明,该cDNA序列与其它已登录的SAD基因cDNA序列一致性最高可达93.1%;编码的氨基酸蛋白序列性一致最高为89%....