本发明采用高通量筛选的方法对所述的高丝氨酸乙酰转移酶突变体质粒文库进行高通量筛选,获得了三个酶活性提高的突变体,其突变位点分别为g118v、f147i和m182t(即原始基因序列的第118位由甘氨酸突变为缬氨酸,第147位由苯丙氨酸突变为异亮氨酸,第182位由甲硫氨酸突变为苏氨酸)。 本发明还对所述的高丝氨酸乙酰转移酶...
本发明利用易错PCR随机突变和基于结构信息的定点饱和突变方法获得了多种酶活性和/或抗反馈抑制能力提高的高丝氨酸乙酰转移酶突变体,相对于野生型的高丝氨酸乙酰转移酶存在G118V、F147I、M182T和M240G中一个或多个突变。在一具体实施中,突变体的酶活性比野生型提高了15.2倍,并具有较强的反馈抑制抗性,当10 mM O...