二代测序技术虽然通量很高,成本低廉,但是读长实在太短,主流的Illumina测序仪,常规模式只能测PE150的长度,靠着软件算法上的进步才得以可用。由此三代测序走上了历史舞台。 普遍认为三代测序就是单分子测序,即理论上可以进行超长读长,不需要进行PCR扩增的测序。以SMRT(Pacific Biosciences)技术和Oxford Nanopore为代表。
第一、二、三代测序技术都是基于边合成边测序的原理,因此Nanopore技术被一些人(包括我)称为第四代测序技术; 而随着测序技术的发展和成熟,逐渐形成基因测序产业链:
第二代测序技术原理: 第二代测序技术是基于测序-by-synthesis原理,是通过将DNA组装到表面上,并添加能够照亮每个核苷酸的化学试剂进行测序。这些试剂可以逐个核苷酸累加,并用相应的光信号发送给计算机进行分析。第二代测序技术包括Illumina, 454, Ion Torrent,和SOLiD。Illumina使用激光照亮DNA序列中的核苷酸,并记录生成的...
不同于第二代测序依赖于DNA模板与固体表面相结合然后边合成边测序,第三代分子测序,不需要进行PCR扩增。 (1)Helico BioScience 单分子测序技术。该测序是基于边合成边测序的思想,将待测序列随机打断成小分子片段并用末端转移酶在 3' 末端加上 poly(A),以及在pol...
其原理基于DNA链延伸,即通过将DNA链合成过程中加入少量的dideoxy核苷酸(ddNTP),使得DNA链延伸在一些特定位置停止,并通过凝胶电泳分析停止位置来确定每个核苷酸的顺序。 一代测序技术的特点是: 1.准确性较高,可以达到99.99%的准确率。 2.读长较短,一般为500至1000个碱基。 3.测序过程复杂,需要进行多次扩增和凝胶...
小结:二代测序相比一代测序大幅降低了成本,保持了较高准确性,并且大幅降低了测序时间,将一个人类基因组从3年降为1周以内,但在序列读长方面比起第一代测序技术则要短很多,这也给三代测序提供了发展空间。 三、独辟蹊径补空缺——三代测序:单分子测序 ...
1.6万 1 1:50 App 二代测序技术的原理(Illumina测序方法) 6.9万 153 31:26 App 基因测序的基础,测序原理,一代,二代和三代测序 1231 -- 0:48 App 60s了解鸟枪法测序 601 -- 10:28 App 二代测序|捕获法|预文库构建 1467 9 30:45 App Illumina二代测序的原理 37.4万 286 48:57 App 【纪录...
二、基因测序技术原理及方法 1. 基因一代测序技术原理及方法 2. 基因二代测序技术原理及方法 3. 基因三代测序技术原理及方法 三、基因测序技术在生物研究中的应用 1. 基因一代测序技术在生物研究中的应用 2. 基因二代测序技术在生物研究中的应用 3. 基因三代测序技术在生物研究中的应用 四、基因测序技术在医...
朱良俊-DNA测序技术一代二代三代概述及基本原理 00:00 00:00 倍速 浏览器不支持该音视频你可以 刷新 试试 70011103.5-2896b0253471af5ab58e2297688ebab9当前缓冲中 下载客户端缓存视频不卡顿 收藏 分享 手机看 侵权/举报朱良俊-DNA测序技术一代二代三代概述及基本原理 2021年7月2日发布 37:11 朱良俊-DNA...