RPA等温扩增技术检测方法 1.电泳法:在RPA的基础上,用凝胶电泳的技术进行终产物检测。 2.EXO探针法:在RPA的基础上,加入了核酸外切酶III(exonuclease III,即exo)和exo荧光探针,核酸外切酶III会特异地切割荧光探针(THF位点),然后荧光集团与淬灭集团分开,发出荧光信号,通过荧光收集的仪器来实时监控荧光值的变化。 图2.E...
总之,重组酶聚合酶扩增(RPA)技术以其独特的优势和广泛的应用前景,正在成为分子生物学和生物技术领域的重要工具。随着技术的不断进步和应用的不断拓展,RPA技术将在未来发挥更加重要的作用。 赛默飞RPA新品推荐 Invitrogen Lyo-ready RPA Kit(货号:A7212...
RPA等温扩增技术检测方法 1.电泳法:在RPA的基础上,用凝胶电泳的技术进行终产物检测。 2.EXO探针法:在RPA的基础上,加入了核酸外切酶III(exonuclease III,即exo)和exo荧光探针,核酸外切酶III会特异地切割荧光探针(THF位点),然后荧光集团与淬灭集团分开,发出荧光信号,通过荧光收集的仪器来实时监控荧光值的变化。 图2.E...
RPA技术主要由重组酶和聚合酶组成,它们能够有效地调节DNA复制,有效地实现大规模DNA扩增。重组酶可以有效地识别模板DNA,分解它们,将分解的DNA片段与新的碱基配对,从而创建一个合成的DNA片段。聚合酶能够高效地连接碱基,形成一个双链DNA特有的发光结构,并能够有效地将其复制为许多份。 RPA技术可以在体外快速、准确地检测...
RPA未来展望 RPA技术作为一种新兴的核酸扩增技术,未来发展前景广阔。以下是一些可能的发展方向: 1. 提高特异性和灵敏度:通过优化反应条件和引物设计,进一步提高RPA技术的特异性和灵敏度。 2. 拓展应用领域:RPA技术在更多领域的应用,如个体化医疗、疾病监测和公共卫生等。
RPA抗干扰能力强,检测结果可与PCR高度一致。此外,RPA可以在37-42°C下运行,无需复杂的温度控制设备,非常适合资源匮乏环境下的现场检测,并可以在20 min内得到检测结果,有利于样品的大规模筛选和快速检测。2. 反应机理 重组酶聚合酶扩增技术通过模拟DNA体内扩增,在等温条件下产生目的片段。该技术主要依赖重组酶、...
自20世纪90年代初以来,大量的等温核酸扩增方法涌现,有基于核酸序列的扩增(NASBA,又称转录介导扩增,TMA)、信号介导的核糖核酸扩增技术(SMART)、解旋酶依赖性扩增(HDA)、重组酶聚合酶扩增(RPA)、滚环扩增(RCA)、多重置换扩增(MDA)、环介导的等温扩增(LAMP)和链置换扩增(SDA)。其中RPA反应条件温和,扩增效率高,非常...
重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA)是一种新型核酸恒温扩增技术,可以在37~42 ℃条件下,10~30 min内实现待测靶标的快速检测。它具有反应灵敏度高、特异性强、对仪器依赖程度低且可整合多种检测模式等优点,特别适用于基层和现场即时检测,可广泛应用于体外诊断、动物疫病、食品安全、生物...
1. 提高特异性和灵敏度:通过优化反应条件和引物设计,进一步提高RPA技术的特异性和灵敏度。 2. 拓展应用领域:RPA技术在更多领域的应用,如个体化医疗、疾病监测和公共卫生等。 3. 集成化和智能化:将RPA技术与智能手机、物联网等技术结合,实现更加便捷和智能的检测系统。