RPA技术原理重组酶聚合酶扩增（Recombinase Polymerase Amplification, RPA）是等温核酸扩增技术之一。RPA技术由英国TwistDx公司于2006年首次推出。其开发的初衷是为了提供一种快速、简便、灵敏的核酸扩增方法，以弥补PCR技术在复杂设备和时间消耗上的不足。RPA技术的核心在于利用多个重组酶、单链结合蛋白和链置换DNA聚合酶在...
RPA最初被证明是一种DNA核酸扩增方法，后来发现通过添加逆转录酶，RNA 也可以作为模板。无论和核酸模板类型如何，在试验中推荐RPA扩增子长度应低于500个核苷酸，大多数RPA扩增子长度在100到250个核苷酸之间，在此区间内会产生快速有效的扩增。引物 与PCR不同，RPA引物的长度相对较长（建议至少为30个核苷酸，但通常在3...
1. 临床诊断:RPA技术可用于快速检测病原体DNA或RNA,包括病毒、细菌和寄生虫等。例如,RPA在新冠病毒(SARS-CoV-2)的快速检测中发挥了重要作用。 2. 食品安全:RPA可用于检测食品中的病原微生物或转基因成分,确保食品安全。 3. 环境监测:RPA技术应用于检测环境中的污染物或病原体,如水体中的病原菌和病毒。 4....
重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA)是一种新型核酸恒温扩增技术,可以在37~42 ℃条件下,10~30 min内实现待测靶标的快速检测。它具有反应灵敏度高、特异性强、对仪器依赖程度低且可整合多种检测模式等优点,特别适用于基层和现场即时检测,可广
RPA等温扩增技术检测方法 1.电泳法:在RPA的基础上,用凝胶电泳的技术进行终产物检测。 2.EXO探针法:在RPA的基础上,加入了核酸外切酶III(exonuclease III,即exo)和exo荧光探针,核酸外切酶III会特异地切割荧光探针(THF位点),然后荧光集团与淬灭集团分开,发出荧光信号,通过荧光收集的仪器来实时监控荧光值的变化。
自20世纪90年代初以来,大量的等温核酸扩增方法涌现,有基于核酸序列的扩增(NASBA,又称转录介导扩增,TMA)、信号介导的核糖核酸扩增技术(SMART)、解旋酶依赖性扩增(HDA)、重组酶聚合酶扩增(RPA)、滚环扩增(RCA)、多重置换扩增(MDA)、环介导的等温扩增(LAMP)和链置换扩增(SDA)。其中RPA反应条件温和,扩增效率高,非常...
1. 提高特异性和灵敏度:通过优化反应条件和引物设计,进一步提高RPA技术的特异性和灵敏度。 2. 拓展应用领域:RPA技术在更多领域的应用,如个体化医疗、疾病监测和公共卫生等。 3. 集成化和智能化:将RPA技术与智能手机、物联网等技术结合,实现更加便捷和智能的检测系统。
一步式RPA检测 结论与未来展望 作者 参考文献略 这是一篇发表于Analyst的一篇综述性文章,全面的讲述了重组聚合酶扩增技术的发展进程和技术要点,这两年核酸检测也比较火热,恒温扩增技术对于IVD行业算是其中一个研究方向,想了解这方面的朋友可以往下翻翻。 摘要 自1983 年出现经典聚合酶链反应 (PCR) 方法以来,核酸扩增...
1. 临床诊断:RPA技术可用于快速检测病原体DNA或RNA,包括病毒、细菌和寄生虫等。例如,RPA在新冠病毒(SARS-CoV-2)的快速检测中发挥了重要作用。 2. 食品安全:RPA可用于检测食品中的病原微生物或转基因成分,确保食品安全。 3. 环境监测:RPA技术应...