明胶酶谱法的复性原理:在电泳过程中,SDS与样品中的MMPs结合(当然是可逆性结合),破坏其氢键、疏水键而使MMPs不能发挥其分解明胶的作用,而只有当将胶置Triton中洗脱(最好是放在摇床上摇,30min/次,做2次或15min/次,4次。静置于Trition中是不妥的。)时,由于SDS被Triton结合而去除,从而使MMPs恢复了活性。
酶谱法基本过程包括样品通过SDS-PAGE电泳分离，随后在含有二价金属离子的缓冲系统中使MMP-2和MMP-9活性恢复，继而在凝胶中水解明胶。最后，使用考马斯亮蓝对凝胶进行染色，脱色后在蓝色背景下形成白色条带，条带强度与MMP-2和MMP-9活性呈正比。复性原理在于电泳过程中，SDS与MMPs结合，破坏其氢键和疏水键...
检测原理: 本试剂盒采用凝胶反相酶谱法(Zymography)检测MMP-2、MMP-9 活性及其无活性前体酶原谱系。Zymography 是一种广为使用的、基于SDS-PAGE 电泳和反相凝胶染色的蛋白酶检测方法,其灵敏度可达1 nM,高于ELISA方法,其基本原理和程序是:制备含有胶原酶底物的SDS-PAGE凝胶,含蛋白酶的样品在此凝胶中进行电泳,电泳时...
【答案】：双酶消化法是绘制DNA中两个或两个以上限制性内切核酸酶图谱所采用的方法。做法是在两个限制性内切核酸酶分别单独消化DNA分子的基础上，再用这两个酶同时或先后消化DNA，根据它们的结果构建物理图谱。
双酶消化法是一种绘制DNA限制性内切核酸酶图谱的方法。该方法通过分别使用两个或更多限制性内切核酸酶...
一、酶标仪荧光光谱测定的原理 酶标仪荧光光谱测定利用分子结构中激发态和基态之间的跃迁来进行荧光发射和荧光激发,以此来检测样品中有机物质的含量。该技术能够对有机物质在荧光物理特性上的差异进行分析,具有高灵敏度和高特异性的优点。 二、酶标仪荧光光谱测定的方法 1. 样品制备...
酶作为一种生物催化剂,在生物化学反应中起着至关重要的作用。为了研究酶的性质和功能,经常需要对其进行分离纯化。色谱柱作为一种有效的分离工具,在酶的分离过程中发挥着关键作用。 一、色谱柱的选择 在选择用于酶分离的色谱柱时,需要考虑酶的特性以及分离目的。常见的色谱柱类型包括离子交...
当有有机磷农药残留存在时,胆碱酯酶的水解活力被抑制,使其呈色反应受阻,从而在薄层板的玫瑰红色背景上出现有机磷农药白色斑点,以示阳性。根据斑点大小、清晰度与农药的标准点进行比较,可大致定量。酶源要新鲜,酶溶液喷量要适宜,太多则降低显色灵敏度,所显农药斑点退得快。各种酶源灵敏度不同,应先测其灵敏度。
双酶消化法是一种用于绘制DNA中限制性内切核酸酶图谱的方法。该方法的步骤包括先分别用两个或两个以上...