实验材料:烟草叶片愈伤组织。实验方法:1.70%乙醇净化工作台并擦洗干净,将所用的材料、工具、培养基等放入工作台。 打开紫外灯和风机, 15 分钟后关闭紫外灯开始方可操作。2. 在超净台上用无菌镊子夹取出生长旺盛的松软愈伤组织,放入 150ml 三角瓶 2、中并轻轻夹碎 , 每个三角瓶加入培养基 20-30ml ,每瓶接种 1...
4、根据各农杆菌OD计算,取0.5/OD农杆菌至2ml的离心管中 4度,4000g离心15min,弃上清,1mlAs-Medium重悬 使每个离心管中农杆菌菌液所含基因:启动子=9:1 (注:视频看起来是两种质粒转化两次,再用两种菌液混合)室温孵育1-2h 5、给烟草贴上标签,用去掉针头的注射器从表皮背面注射适量的菌液,侵染后用记号笔圈定...
我们在烟草遗传转化/转基因技术方面具备极强的实力,已经有7个不同品种转化成功,短至2.5个月出苗,再生植株阳性率达到80%以上。由我们克隆基因、构建载体并转化烟草的项目,成功率更高!能够为科研机构和种子企业提供专业、便捷、全面的技术支持与服务,在基因克隆、基因编辑、载体构建、植物转基因、高通量筛选、检测分析...
烟草是遗传转化的模式植物,已经建立了一套完善的转化再生体系。本实验以烟草为实验材料,了解根癌农杆菌介导法的基本原理和一般步骤,掌握遗传转化的基本操作技术。 实验要求: 掌握根癌农杆菌侵染植物获取转基因材料的方法;理解农杆菌介导途径进行基因转化的机理;了解转基因植物筛选的方法。 实验原理 根癌农杆菌是一种能...
烟草瞬时转化实验步骤.docx 4、处理液:10mL配方如下母液配方(10ml配方):0.5MMES200ul0.976g1MMgCl2100ul100mM乙酰丁香酮10ul2.03g0.196g(使用DMSO溶解)烟草叶片瞬时转化实验试验方法一、实验材料及药品pCAMBIA1381Z-Luc载体、Gv3101农杆菌菌株及其感受态、MES、MgCI2、乙酰丁香通、5-6周本氏烟草等二、载体构建及农...
烟草(Nicotiana tabacum)是一年生茄科草本植物,起源于热带和亚热带美洲,是生物碱尼古丁的丰富来源,长期作为草药和社会兴奋剂使用。到目前为止,烟草已经在世界范围内种植,它不仅是主要的经济作物,而且是研究植物遗传学、分子生物学和细胞生物学的模式植物。 提供多种烟草遗传转化方法。目前应用较为广泛的方法是农杆菌介导的...
酰5-6周本氏烟草等二、体构建及杆菌化载农转烟草瞬化用融合时转实验选Luc信号的pCAMBIA 1381Z-Luc体,体构建程是将南载载过拟芥及菊花的FT启子分别采用双切双的常体动连规载构建方式将启子构建到动pCAMBIA 1381Z-Luc载体上,同将目的基因构建到时pMDC43或pMDC32或pORE体上作超表达体行后的瞬化载为载进续时...
烟草是遗传转化的模式植物,已经建立了一套完善的转化再生体系。本实验以烟草为实验材料,了解根癌农杆菌介导法的基本原理和一般步骤,掌握遗传转化的基本操作技术。 实验要求: 掌握根癌农杆菌侵染植物获取转基因材料的方法;理解农杆菌介导途径进行基因转化的机理;了解转基因植物筛选的方法。 实验原理 根癌农杆菌是一种能...
烟草农杆菌转化实验步骤1 烟草农杆菌转化实验 实验配方：1L RMOP: 20×大量元素50ml 200×微量元素5ml 200×有机5ml 200×铁盐5ml 3%蔗糖30g 0.8%琼脂（国产）4g/500ml 灭菌后，每500ml培养基加入:0.1mg/L NAA 1mg/ml NAA 50μL 1mg/L 6-BA 1mg/ml6-BA 500μL YEB:液体培养基：1L 酵母提取物1g 牛...
内容提示: 19实验七 农杆菌介导法转化烟草 一、实验目的 (1)了解根癌农杆菌介导法的基本原理和一般步骤。 (2)掌握遗传转化的基本操作技术。 二、实验原理 根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)是一种能诱发植物产生肿瘤的细菌,根癌农杆菌中含有诱导植物产生肿瘤的质粒(Tumor inducing plasmid),简称为 Ti 质粒。