3. 使用异源病毒的包膜蛋白组装VSV假病毒:构建SARS-CoV-2 S的表达质粒,转染细胞后,全长的S蛋白可表达并锚定在细胞膜上,用以上获得的G*ΔG-VSV侵染细胞后,提供了不含G基因的基因组,表达了除G蛋白之外的VSV的酶和结构蛋白,然后病毒出芽从细胞中释放,即可获得S蛋白包膜的重组假病毒rVSV-SARS-CoV-2 S,具有 ...
重组VSV是G糖蛋白基因缺失的,该缺失导致VSV自我复制缺陷的。G糖蛋白基因通常被替换为报告基因(如荧光蛋白基因、荧光素酶报告基因或分泌型碱性磷酸酶基因)用于病毒的转导效果测定。生产VSV假病毒主要由三个步骤构成:1. 使用质粒初步制备VSV;2. 扩增G糖蛋白补全的VSV;3. 使用异源病毒的包膜蛋白组装VSV假病毒。
水疱性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus,VSV)载体在研究病毒颗粒入侵宿主细胞、辨认介导病毒感染细胞的细胞表面受体、筛选病毒抑制药物以及疫苗开发方面有着广泛的应用。VSV病毒载体可以高效地利用异源病毒的包膜蛋白进行假型化(Presudotypted),比如那些需要在高生物安全等级实验室操作的病毒的包膜蛋白。 重组VSV是G糖...
进入细胞的假病毒会表达除G蛋白外的所有VSV蛋白,这些结构蛋白会被组装成病毒包膜,包装有缺陷的VSV基因组。报告基因Fluc表达后,加入底物即可检测发光信号,反映感染细胞中假病毒的数量。如果在细胞感染前与含有中和抗体或分子抑制剂的样品共同孵育,可以阻止细胞进入过程,通过化学发光还原的结果确定样品中抗...
有朋友不太理解VSV假病毒制备过程中为何要使用痘病毒感染细胞以及转染时除了VSV全长cDNA外需要添加辅助质粒。要弄清楚这些问题要弄明白一下两点:1、负链RNA病毒遗传物质信息流动方向;2、病毒拯救流程;一、非逆转RNA病毒包含负链RNA病毒和正链RNA病毒 1、正链RNA病毒 正链的RNA病毒与mRNA相似,可以直接被宿主细胞...
国外医学造传学分册 2001年 第24卷 第l期 ·1l· VSV—G假型反转录病毒载体在基因治疗中的应用 王红卫综述 薛京伦审校 (复旦大学遗传所,上海200433) 摘要:VSV—G假型反转录病毒是一种新型的基因转移载体,具有浦度高,宿主范围广,抗补体灭活等优点。高体厦括体基 因转移研究表明,VSV~9候型病毒能够有效地将...
VSV- G假型反转录病毒是一种新型的基因转移载体 ,具有滴度高 ,宿主范围广 ,抗补体灭活等优点.离体及活体基因转移研究表明 ,VSV- G假型病毒能够有效地将外源基因转移到多种靶细胞中 ,并获得稳定的转基因表达.本文就近年来 ,VSV- G假型病毒在造血细胞 ,免疫细胞 ,肝细胞 ,以及神经元细胞介导的基因治疗中的...
VSV- G假型反转录病毒是一种新型的基因转移载体 ,具有滴度高 ,宿主范围广 ,抗补体灭活等优点。离体及活体基因转移研究表明 ,VSV- G假型病毒能够有效地将外源基因转移到多种靶细胞中 ,并获得稳定的转基因表达。本文就近年来 ,VSV- G假型病毒在造血细胞 ,免疫细胞 ,肝细胞 ,以及神经元细胞介导的基因...
VSV假病毒包装原理 重组VSV是G糖蛋白基因缺失的,该缺失导致VSV自我复制缺陷的。G糖蛋白基因通常被替换为报告基因(如荧光蛋白基因、荧光素酶报告基因或分泌型碱性磷酸酶基因)用于病毒的转导效果测定。VSV假病毒应用举例 2019年12月FDA批准全球首个埃博拉疫苗-Ervebo V920就是基于此原理而研发而成,通过...
“含GFP基因的逆转录病毒与VSV-G蛋白重组形成高滴度假病毒”出自《上海交通大学学报(医学版)》期刊2004年第4期文献,主题关键词涉及有疱疹性口腔炎病毒糖蛋白、绿色荧光蛋白、转染、假病毒等。钛学术提供该文献下载服务。