建议在实验开始阶段分析经Annexin V、PI分别单染的细胞来调整荧光补偿去除光谱重叠。根据未处理细胞空白对照和经Annexin V、PI分别细胞染色后的单染对照的分析设定十字门的位置;4 正常细胞:Annexin ⅴ-FITC (-);PI (-); 早期凋亡细胞:Annexin ⅴ-FITC (+);PI (-); 晚期凋亡细胞: Annexin ⅴ-FITC (+);PI ...
1，必须活细胞检测，不能用能破坏细胞膜完整性的固定剂和穿透剂固定或穿膜。2，特殊细胞的染色方法：在消化或吹打时，有些细胞(如神经元细胞)很容易受到损伤，导致晚期凋亡或坏死比例非常高，不能反映真实结果。实验的解决方法：先低速离心，吸取细胞培养板中的液体，留少许液体，加入适量PI和Annexin-V染色10min后，...
艾美捷Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒提供了一种简单有效的方法将不同凋亡时期的细胞有效区分开。凋亡早期细胞膜完整，表面暴露PS的细胞Annexin V-FITC染色呈阳性(绿色)，PI可以识别晚期凋亡和坏死细胞，这些细胞已失去质膜完整性，因此晚期凋亡和坏死细胞的细胞将被Annexin V-FITC和PI双重标记(绿色和红色...
一种与PS高亲和力结合的蛋白质,能够标记外翻的PS,从而检测早期凋亡细胞。 PI染色:PI是一种能够进入膜完整性已受损的细胞的染料。由于活细胞和早期凋亡 细胞的膜完整性较好,PI无法进入,因此这些细胞对PI是阴性的。 实验步骤 这里再简单复述一次使用Annexin V-FITC/PI检测试剂盒的标准实验步骤: 细胞培养与收集: 将实...
Annexin V-EGFP的绿色荧光通过FITC通道(FL1)检测;PI红色荧光通过PI通道(FL2或FL3)检测,建议使用FL3。 荧光补偿调节:使用未经凋亡诱导处理的正常细胞,作为对照进行荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。 三、注意事项 1. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide (PI)避光保存及使用。
单染管:分别需要只加PI和荧光标记的Annexin V两个单染管,用来调节2个荧光通道的补偿值; 荧光素之间的补偿值应保持恒定;双荧光染色时,如果一个荧光很强,而另一个很弱,则一定要做补偿;补偿只应用在同一个激光激发的不同荧光素之间,避免补偿不足和过度补偿。【3】 ...
早期和晚期的凋亡细胞的一个重要区别在于细胞膜的完整性(凋亡早期细胞没有丧失膜的完整性),故可以用碘化丙啶(PropidiumIodide,PI)来染色加以区分。 图源:网络 艾美捷Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒特点: 1. 即开即用,不需要专门花时间准备各种成分。 2. 整合了Annexin V-FITC和PI检测法的优点,...
PI），PI可以染色坏死细胞或凋亡晚期丧失细胞膜完整性的细胞,呈现紅色荧光,用 Annexin V-FITC和碘化丙啶染色后,正常的活细胞不被Annexin V-FITC和PI染色;凋亡早期的细胞仅被Annexin V-FITC染色,PI染色呈阴性;坏死細胞和凋亡晚期的细胞可以同时被 Annexin V-FTC和PI双重染色,以区别凋亡早期细胞。
Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒( Annexin V-FITC/ PI Apoptosis Detection Kit)是用FITC融合的重组人 Annexin V来检测细胞凋亡时出现在细胞膜表面的磷酯酰丝氨酸(PS)的一种细肥凋亡检测试剂盒。可以使用流式细胞仪、荧光微镜或其它荧光检测设备进行检测。
早期和晚期的凋亡细胞的一个重要区别在于细胞膜的完整性(凋亡早期细胞没有丧失膜的完整性),故可以用碘化丙啶(PropidiumIodide,PI)来染色加以区分。图源：网络 艾美捷Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒特点：1. 即开即用,不需要专门花时间准备各种成分。2. 整合了Annexin V-FITC和PI检测法的优点,提高了...