14000rpm′15min最后将沉淀溶解在TE buffer中,加DNA Loading Buffer 1.2%琼脂糖凝胶电泳,EB染色并照相。 3. 凋亡细胞DNA 含量的流式细胞计分析 方法:收集细胞,70%冷乙醇(in PBS)4°C 固定过夜,PBS 洗涤,1000rpm′10min RNase A(0.5mg/ml)37°C 消化30min PI(50mg/ml)染色,室温避光15min,FACScan 分析DNA...
Annexin V-FITC染色液用于鉴定凋亡细胞。Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸(PS)有高度亲和力。当细胞发生凋亡时，膜内侧的磷脂酰丝氨酸(PS)外翻到膜表面，而被荧光染料FITC标记的Annexin V结合，可通过流式细胞仪或荧光显微镜进行检测。Annexin V搭配PI或7-AAD、DAPI等DNA染色液使用，可区分...
加入5μL Annexin V-FITC,轻轻吹打混匀,加入5μL PI 轻轻吹打混匀,室温避光孵育5-15min。(PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,时间允许,可以在检测前5分钟加入PI); 5 流式细胞仪检测或荧光显微镜观察。最好在1h内检测。 四、注意事项1Annexin V-FITC与PI量微,请在使用前低速离心将盖内壁上的液体甩...
所以，通过Annexin V和PI双染的方法，就可以把早期凋亡的细胞与晚期凋亡加坏死的细胞区分开来。Annexin V-FITC/PI法的实验步骤：1，细胞按照实验方案进行凋亡诱导，300g离心5min，弃上清，收集细胞，PBS洗涤细胞一次，轻轻重悬细胞并计数。2，取1-5×10^5重悬的细胞，300g离心5min，弃上清。用PBS洗涤细胞一次，离...
Annexin V-FITC/PI双染流式分析细胞凋亡（图1）：图2：用阴性对照(左)或staurosporine(一种凋亡诱导剂)处理Jurkat细胞4小时，清洗，然后用ICT的Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒(货号9124)染色10分钟。在流式细胞仪上读数细胞。阴性对照组仅在2.7%的细胞群中诱导了Annexin V-FITC标记(R2，左)，而staurosporine实验组...
4. Annexin V-FITC是光敏物质,在操作时要注意避光。 附:凋亡的其它检测方法 一、细胞凋亡的形态学检测 根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测 方法。 1 光学显微镜和倒置显微镜 (1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴...
4. Annexin V-FITC是光敏物质,在操作时要注意避光。 附:凋亡的其它检测方法 一、细胞凋亡的形态学检测 根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测 方法。 1 光学显微镜和倒置显微镜 (1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴...
4. Annexin V-FITC是光敏物质,在操作时要注意避光。 附:凋亡的其它检测方法 一、细胞凋亡的形态学检测 根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测 方法。 1 光学显微镜和倒置显微镜 (1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴...
Annexin V-FITC染色液,Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合,将Annexin V标记荧光染料,利用流式细胞仪检测细胞凋亡。
1.长期不用可以-20℃保存。 2.Annexin V-FITC染色液避免反复冻融。多次冻融会导致失效。 3.Annexin V-FITC染色液需要长期保存时可以根据使用情况进行小量分装后-20℃保存。 4.试剂拆封后请尽快使用完! 有效期 1年 检测方法 1.流式细胞仪 2.激光共聚焦 3.荧光显微镜 ...