解析 答:去垢剂可分为离子型和非离子型两种。十二烷基磺酸钠(SDS)是常用的离子型去垢剂,它不仅可使细胞膜崩溃,并与膜蛋白的疏水部分结合使其分离,而且还破坏膜蛋白内部的非共价键,使蛋白变性,所以不宜用于分离有功能的膜蛋白。Triton X-100是温和性去垢剂,它可以使膜脂溶解,又不使蛋白变性,可分离到有生物功能...
【答案】: 去垢剂可分为离子型和非离子型两种。十二烷基磺酸钠(SDS)是常用的离子型去垢剂,它不仅可使细胞膜崩溃,并与膜蛋白的疏水部分结合使其分离,而且还破坏膜蛋白内部的非共价键,使蛋白变性,所以不宜用于分离有功能的膜蛋白。TritonX-100是温和性去垢剂,它可以使膜脂溶解,又不使蛋白变性...
SDS,NP-40,TritonX-100这三种去垢剂的作用是不同的,或者说作用力量强弱不同。 SDS属于离子型去垢剂,最厉害,基本可以把细胞完全破掉,DNA会释放出来,裂解液变得很粘稠。 NP-40是很温和的去垢剂,1%浓度的基本可以破坏掉胞膜,而对核膜破坏的作用弱,结合特定的buffer可以获得胞浆蛋白。 TritonX-100的能力介于NP40...
TritonX-100的能力介于NP40和SDS 之间,偏向于NP40,也是常用的细胞裂解液成分之一,在保护蛋白活性方面有一定作用(SDS基本会使蛋白变性失活)。 但是去垢剂属性只是一方面,buffer、配比、浓度、提取方法和材料处理也都是关键因素,建议参考《分子克隆》来做。
十二烷基磺酸钠(SDS)是常用的离子型去垢剂,它不仅可使细胞膜崩溃,并与膜蛋白的疏水部分结合使其分离,而且还破坏膜蛋白内部的非共价键,使蛋白变性,所以不宜用于分离有功能的膜蛋白。Triton X-100是温和性去垢剂,它可以使膜脂溶解,又不使蛋白变性,可分离到有生物功能的膜蛋白。
Western blotting的裂解缓冲液,其主要功能在于裂解细胞以提取蛋白质。其中,SDS即十二烷基硫酸钠,是一种有效的蛋白质变性剂,能够破坏蛋白质间的相互作用,使其在电泳过程中保持线性形态,便于后续分析。RIPA裂解液则是另一种常用的裂解液,它的组成包括50 mM Tris-HCl(pH 7.4,三羟甲基氨基甲烷-盐酸...
SDS属于离子型去垢剂,最厉害,基本可以把细胞完全破掉,DNA会释放出来,裂解液变得很粘稠。 NP-40是很温和的去垢剂,1%浓度的基本可以破坏掉胞膜,而对核膜破坏的作用弱,结合特定的buffer可以获得胞浆蛋白。TritonX-100的能力介于NP40和SDS 之间,偏向于NP40,也是常用的细胞裂解液成分之一,在保护蛋白活性方面有一定作用...
去垢剂可分为离子型和非离子型两种。十二烷基磺酸钠(SDS)是常用的离子型去垢剂,它不仅可使细胞膜崩溃,并与膜蛋白的疏水部分结合使其分离,而且还破坏膜蛋白内部的非共价键,使蛋白变性,所以不宜用于分离有功能的膜蛋白。Triton X-100是温和性去垢剂,它可以使膜脂溶解,又不使蛋白变性,可分离到有...
TritonX-100的能⼒介于NP40和SDS 之间,偏向于NP40,也是常⽤的细胞裂解液成分之⼀,在保护蛋⽩活性⽅⾯有⼀定作⽤(SDS基本会使蛋⽩变性失活)。但是去垢剂属性只是⼀⽅⾯,buffer、配⽐、浓度、提取⽅法和材料处理也都是关键因素,建议参考《分⼦克隆》来做。
本工作研究了SDS和Triton X-100对细胞膜通透程度的差异,优化了最佳的透膜条件;考察了SDS和Triton X-100的选择对具体实验结果的影响,并应用合肥光源软X射线纳米显微线站的全场透射成像技术研究了透膜前后细胞形态的变化.结果表明:0.25%Triton X-100的透膜效果优于4%SDS.0.25%Triton X-100的最优处理时间为10 min...