TR-FRET（Time-Resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer，时间分辨荧光共振能量转移）是一种用于研究分子间相互作用的生物物理技术。它结合了两种技术：荧光共振能量转移(FRET)和时间分辨荧光(TRF，Time-Resolved Fluorescence)。荧光共振能量转移原理图 荧光共振能量转移(FRET)是一种物理现象，其中一个荧光分子（供体...
TR-FRET是TRF（Time-Resolved Fluorescence，时间分辨荧光）和FRET（Fluorescence Resonance Energy Transfer，荧光共振能量转移）技术的综合。TRF技术是利用镧系元素的荧光发射时间长的特性，通过延迟检测的方式降低背景噪音的检测方法。HTRF 延迟检测原理 FRET技术是当供体荧光分子的发射光谱和受体荧光分子的激发光谱重叠的时候...
对于PROTAC,像AlphaScreen®、TR-FRET或luminescence methods(自发光方法)NanoBRET™等方法可以在微孔板中进行,以测量靶标和E3连接酶之间的相互作用。 AlphaScreen原理及步骤 9.2 激酶活性测定 激酶活性主要通过测量底物磷酸化变化的夹心测定来分析,如应用说明所示使用THUNDER™ TR-FRET细胞激酶免疫测定分析ERK1/2、p...
图4 TR-FRET技术用于筛选KRAS/cRAF小分子阻断剂技术原理模型 如图所示，KRAS WT/GTP/cRAF的相互作用是通过使用Eu标记的抗Tag1抗体（TR-FRET供体）和accepter标记的抗Tag2抗体（TR-FRET受体）检测的。由于KRAS WT/GTP/cRAF相互作用，供体抗体与受体抗体接近，供体抗体的激发会触发向受体抗体的荧光共振能量转移(FRET)...
时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)技术依赖于供体荧光基团和受体荧光基团之间的距离,当供体分子和受体分子彼此靠近时,通过荧光共振能量转移产生信号。 荧光共振能量转移技术(FRET)原理:当供体和受体接近时,产生FRET信号 在TR-FRET实验中,由于所有反应都在同一溶液中进行,无需像传统荧光实验那样进行复杂的样品处理和额外...
trfret原理trfret原理 有一种超酷的技术叫 TRFRET,这可真是个神奇的玩意儿! TRFRET 呢,全称是 Time-Resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer,翻译过来就是时间分辨荧光共振能量转移。听着是不是有点复杂?别担心,我慢慢给你解释。 想象一下,有两个小伙伴,一个叫“供体”,一个叫“受体”。这俩小伙伴都...
THUNDER检测胞内磷酸化蛋白采用经典双抗夹心模型,抗体结合抗原后,用320/340nm光激发供体Eu,产生荧光共振能量转移(FRET)后,进而激发受体产生665nm信号。信号强度与胞内蛋白磷酸化水平成正比。 图7:THUNDER磷酸化蛋白检测原理图 第一步:细胞处理,需5分钟或过夜,激动剂/抑制剂处理细胞;第二步:细胞裂解,15~60分钟;第...
TR-FRET工作原理基于两个荧光分子的能量转移 TR-FRET的工作原理基于两个荧光分子的能量转移。当供体荧光分子被激发后，它的能量会在与受体分子相距极近时（通常小于10纳米）通过FRET机制传递给受体分子，受体随之发出荧光。TR-FRET的核心在于使用长寿命的供体荧光分子，例如Eu3+、Tb3+等镧系元素的螯合物。与传统的...
基本原理 荧光共振能量转移(FRET)是指一种荧光标记分子采用荧光共振原理,通过相互作用,在能量转移过程中从一个荧光分子(供体D)向另一个荧光分子(受体A)传递能量。能量转移的发生在一定距离(通常小于10nm)内,该距离也被称为FRET距离。在FRET的过程中,FRET现象被一系列因素所影响,如荧光分子的数量、荧光分子的吸收和...