答:1.THP-1细胞培养过程中出现少量细胞贴壁属于正常情况,THP-1细胞被发现自发贴壁[3],可以轻吹收集细胞或者丢弃贴壁部分细胞;2.当贴壁细胞比例高于20%,建议排查细胞生长培养箱温度及CO2浓度、培养基成分(营养体系的酸碱性)、以及培养瓶可用非TC处理过的培养瓶,不利于细胞贴壁;3.更换血清可能会导致THP-1细胞...
A:受到运输影响,悬浮细胞会短暂性出现形态改变的现象,如伪足等。通过传代培养,1周左右可以恢复正常。一些细胞在运输途中死亡而产生碎片,通过传代离心可以去除(见上文传代篇)。Q:培养过程中细胞发生贴壁怎么办?A: 少量细胞贴壁属于正常情况,将细胞悬液转移至新瓶中即可。当贴壁细胞的比例高于20%,说明细胞生长...
2.1 THP-1细胞培养过程中出现少量细胞贴壁属于正常情况,不需要担心。可以轻吹收集细胞或者丢弃贴壁部分细胞。2.2 但如果当贴壁细胞比例高于20%,说明细胞生长环境有异常,这时候就需要排查培养箱温度及CO2浓度、培养基成分以及培养器皿是否异常。可用非TC处理过的培养瓶,不利于细胞贴壁。3、THP-1复苏不起来怎么办?
首先,我们要讨论的是THP-1贴壁问题。THP-1细胞培养过程中出现少量细胞贴壁属于正常情况(如图4),不需要担心。可以轻吹收集细胞或者丢弃贴壁部分细胞。但如果当贴壁细胞比例高于20%,说明细胞生长环境有异常,这时候就需要排查培养箱温度及CO2浓度、培养基成分,以及培养器皿是否异常。可用非TC处理过的培养瓶,不利于细胞贴壁。
THP-1细胞最常用的分化诱导剂是PMA,添加PMA可导致THP-1细胞贴壁并呈现星状。这些细胞表达一些Mφ分化标志物(CD14和CD36),并且相较于未处理的细胞,具有更强的吞噬能力和释放TNF的能力。然而,目前关于THP-1分化中使用的PMA浓度的报道从5 ng/ml到200 ng/ml不等,关于THP-1细胞诱导时间的报道也有所不同,如24h和...
首先,我们要讨论的是THP-1贴壁问题。THP-1细胞培养过程中出现少量细胞贴壁属于正常情况(如图4),不需要担心。可以轻吹收集细胞或者丢弃贴壁部分细胞。但如果当贴壁细胞比例高于20%,说明细胞生长环境有异常,这时候就需要排查培养箱温度及CO2浓度、培养基成分,以及培养器皿是否异常。可用非TC处理过的培养瓶,不利于细胞贴壁...
若培养基中不添加β-巯基乙醇,长期培养细胞可能会出现大量贴壁,严重聚团等情况。THP-1 细 胞 换 液 方 法 离心换液法:1. 准备所需的培养基、离心管以及无菌枪头等;(培养基提前预热)2. 将所有细胞悬液转移至离心管中;3. 900-1000rpm,3min离心;4. 弃上清,加5mL PBS轻轻重悬细胞进行润洗,...
若贴壁细胞比例高于20%,为生长异常,需要排查引起异常的原因。 2.3 THP-1密度依赖性生长,不要害怕密度太高了。THP-1细胞密度低时生长较慢,接种密度建议2-4 x 105个细胞/mL,当细胞密度达到8x105个细胞/mL时进行传代,不建议超过1 x 106个细胞/mL,细胞密度维持在1.0x105 - 1.5x106 细胞/mL。 2.4 细胞会有...
Tips:THP-1培养时,培养基一定要给充足Q细胞贴壁了怎么办?ATHP-1培养时有少量贴壁是正常现象,建议在传代时只吸取上清换瓶培养。或者可以使用不贴壁的无菌培养瓶培养。Q细胞聚团了怎么办?A少量聚团属于正常现象,但较多聚团需要注意,检查培养箱是否正常、培养体系酸碱性以及血清是否合适,适当更换血清。
少量细胞贴壁属于正常情况,将细胞悬液转移至新瓶中即可。当贴壁细胞的比例高于20%,说明细胞生长环境有异常,需排查培养箱设置、培养基成分,以及培养器皿是否异常。 3. 培养过程中细胞发生聚团怎么办? 少量细胞聚团,呈葡萄串状,属于正常现象,特别是细胞密度较低时,易出现这种情况。更换血清品牌或增大血清比例(不超过20...