1. THP-1细胞在偏酸性环境中生长更快,所以当培养基稍微变黄(呈橘红色)时,是适合细胞生长的,此时补液或半换液即可;2. THP-1细胞培养液中需添加β-巯基乙醇(细胞培养级别),若不添加,可能会对细胞状态造成影响;3. THP-1细胞比较难复苏,复苏初期细胞生长缓慢且会有部分细胞破碎,出现黑色细胞碎片,少量...
THP-1细胞培养 THP-1是人急性单核细胞白血病细胞,是单核-巨噬细胞相关研究中的常用细胞系工具,可通过PMA(佛波酯)诱导分化为M0型巨噬细胞,然后根据实验需求进一步诱导为M1或M2型巨噬细胞。 细胞形态:悬浮细胞,圆形,大小均一,小而透亮(下图Fig1来自ATCC网站)。 注意:显微镜下观察之前,可以轻轻晃动培养瓶或孔板,静...
1. 常温细胞:收到细胞后,放进培养箱静置2-4小时,之后将瓶中培养基全部离心(1200rpm或250g,3分钟),去上清,用适量新鲜培养基重悬细胞,按比例接种到新培养瓶中。2. 冻存细胞:收到细胞后,如果不复苏,放进-80℃冰箱暂存或放进液氮长期保存。如果复苏,按照常规复苏步骤操作(见下文复苏篇)即可。小贴士...
1. 取少量细胞悬液进行计数确定细胞密度,密度80万/mL以上传代,并根据计数结果确定传代比例;2. 准备所需的培养基、离心管以及无菌枪头等;(培养基提前预热)3. 用移液器吸取培养瓶内细胞悬液转移至离心管中;4. 900-1000rpm,3min离心收集细胞;5. 在培养瓶中加入适量新鲜培养基;(T25推荐10mL,T...
THP-1单核细胞正常形态为悬浮的体积较小、透亮的圆形细胞,少数聚团成葡萄状,粒粒饱满,轮廓清晰(如图3)。该细胞在偏酸性环境中,生长更快,所以当培养基稍微变黄(呈橘红色)时,是比较适合细胞生长的,此时补液或半换液即可;开启后的1640培养基,长期放置pH会偏高,建议开封后一周内使用完毕。该细胞对血清要求高,血清...
THP-1细胞培养过程中出现少量细胞贴壁属于正常情况(如图4),不需要担心。可以轻吹收集细胞或者丢弃贴壁部分细胞。 如果当贴壁细胞比例高于20%,说明细胞生长环境有异常,这时候就需要排查培养箱温度及CO2浓度、培养基成分,以及培养器皿是否异常。可用非TC处理过的培养瓶,不利于细胞贴壁。
THP-1是从急性单核细胞白血病患者的外周血中分离出的单核细胞。在某些诱导分化剂作用下,THP-1细胞可以被诱导分化为多种巨噬细胞,是研究炎症、免疫反应等领域的理想模型。此外,还可使用CRISPR Cas9技术编辑的THP-1细胞进行巨噬细胞作用机制、免疫应答通路研究、炎症疾病治疗开发等研究。值得注意的是,THP-1是悬浮...
细胞密度不要超过1×106活细胞/ mL。5、该细胞为悬浮细胞,在培养时更喜欢温和处理,培养时尽量少对细胞进行离心处理以此造成对细胞的伤害。换液时不要全培养基更换,传代时使用半换液法对细胞状态较为有利,因此我库建议您使用半换液法进行传代。6、THP-1细胞中需要添加β-巯基乙醇,现用现配,不可直接添加至...
目的观察由线粒体DNA(mtDNA)清除人单核细胞白血病细胞(THP-1细胞)构建的人单核/巨噬细胞系Rho0细胞周期、凋亡、吞噬功能、炎症因子表达变化。 方法取THP-1细胞,使用溴化乙锭(EB)清除细胞中mtDNA,构建新的人单核/巨噬细胞Rho0。取...
巨噬细胞是免疫系统中的重要组成部分,在保护机体免受感染和维持组织平衡方面发挥着关键作用。为了研究巨噬细胞的功能和机制,科学家们创造了一种不需要从患者或动物采集组织的模型,即THP-1细胞。THP-1细胞系最初来自一位急性单核细胞白血病患者的血液,属于悬浮细胞,有分化为多种巨噬细胞的能力,成为巨噬细胞分化...