1. 准备所需的培养基、离心管以及无菌枪头等;(培养基提前预热)2. 将所有细胞悬液转移至离心管中;3. 900-1000rpm,3min离心;4. 弃上清,加5mL PBS轻轻重悬细胞进行润洗,再900-1000rpm,3min离心;Tips:此处PBS润洗是为了去除细胞碎片,平时培养若细胞碎片不多可以忽略此步骤,若碎片偏多,可以重复...
一、培养基与培养体系 THP-1细胞的培养体系通常使用RPMI-1640作为基础培养基,并添加10%的胎牛血清(FBS)和1%的双抗(青霉素/链霉素,P/S)以提供必要的营养和防止污染。此外,一些实验室还会在培养基中加入0.05mM的β-巯基乙醇(β-mercaptoethanol),这是一种常用的培养补充剂,具有抗氧化的作用,可减少氧化...
基础Eagle培养基(Basal Medium Eagle),1955年Eagle设计,BSS+12种氨基酸+谷氨酰胺+8种维生素。简单、便于添加,适于各种传代细胞系和特殊研究用,在此基础上改良的细胞培养基品种有MEM、DMEM、IMDM等。1、BME细胞培养基经典的培养基有很多种,其中 DMEM、 RPMI 1640、 MEM 、 DMEM/F12 都是应用最广泛的培养基。其他...
半换液:细胞状态良好,细胞碎片少,培养基没有变黄的情况 1)将培养瓶竖立静置10-15min,使细胞自然沉降。2)小心吸一半培养基弃掉(若细胞密度较低,可将吸取的一半培养基转移至离心管后1100rpm离心4min,然后用新鲜培养基重悬后放回原瓶培养)。3)原瓶补充一半的新鲜完全培养基。离心换液:细胞状态良好,...
培养攻略之换液篇 1. 补液法:培养基变黄时可补加适量(1~2mL)新鲜培养基,补加1-2次之后,用离心的方式全部换液,离心1200rpm (约250g)3分钟。2. 半换液法:以T25瓶子为例,瓶子里装有5mL培养基。竖起瓶子静置一段时间,待细胞沉底(以肉眼观察到沉底为限),小心吸出2.5mL的培养基,转移到离心管...
1. 准备所需的培养基、离心管以及无菌枪头等;(培养基提前预热) 2. 将所有细胞悬液转移至离心管中; 3. 900-1000rpm,3min离心; 4. 弃上清,加5mL PBS轻轻重悬细胞进行润洗,再900-1000rpm,3min离心; Tips:此处PBS润洗是为了去除细胞碎片,平时培养若细胞碎片不多可以忽略此步骤,若碎片偏多,可以重复润洗2次。
一、THP-1细胞的培养方法 1、细胞复苏 准备工作:15/50mL的离心管,马克笔,培养瓶(T25)/培养皿(直径60mm),RPMI 1640培养基,胎牛血清(FBS),双抗(PS),酒精瓶(消毒杀菌)+酒精棉球,离心管/试剂管架子,移液枪,tip头(1000/200ul)。 (1)首先用酒精棉球擦拭细胞房的实验台子,将我们所需要上述物品放入台子里,并...
答:1.THP-1细胞培养过程中出现少量细胞贴壁属于正常情况,THP-1细胞被发现自发贴壁[3],可以轻吹收集细胞或者丢弃贴壁部分细胞;2.当贴壁细胞比例高于20%,建议排查细胞生长培养箱温度及CO2浓度、培养基成分(营养体系的酸碱性)、以及培养瓶可用非TC处理过的培养瓶,不利于细胞贴壁;3.更换血清可能会导致THP-1细胞...
一、THP-1细胞系的培养 1.细胞描述 物种:人 组织:外周血 细胞形态:悬浮生长,单核细胞,正常形态为悬浮的体积较小、透亮的圆形细胞,少数聚团成葡萄状,粒粒饱满,轮廓清晰 细胞倍增时间:约30~48小时 2.培养条件 完全培养基成分:RPMI-1640+10%FBS(胎牛血清)+0.05mM β-巯基乙醇+1%P/S(双抗,即...
一、培养基选择: THP-1细胞可以在含有10%胎牛血清(FBS)的RPMI-1640培养基中维持生长。此外,可以添加适量的抗生素(如青霉素和链霉素)来防止细菌污染。 二、细胞传代: 当THP-1细胞达到80%~90%的密度时,需要进行细胞传代。首先,将细胞培养液离心,以去除细胞沉淀。然后,用无菌PBS洗涤细胞,以去除残留的培养基。接下...