THP-1细胞是从急性单核细胞白血病患者外周血中分离出来的单核细胞,广泛应用于单核细胞和巨噬细胞相关机制、信号通路等研究;形态和分化特性类似于原代单核细胞和巨噬细胞,在体外,常用PMA(phorbol 12-肉豆酸酯13-乙酸酯)或1α,25(OH)2D3 (1α,25-二羟基维生素D3或vD3)诱导分化THP-1细胞为巨噬细胞。因此,THP-...
THP-1细胞培养 THP-1是人急性单核细胞白血病细胞,是单核-巨噬细胞相关研究中的常用细胞系工具,可通过PMA(佛波酯)诱导分化为M0型巨噬细胞,然后根据实验需求进一步诱导为M1或M2型巨噬细胞。 细胞形态:悬浮细胞,圆形,大小均一,小而透亮(下图Fig1来自ATCC网站)。 注意:显微镜下观察之前,可以轻轻晃动培养瓶或孔板,静...
48 小时后,移除含 PMA 培养液,用 PBS 轻洗 2 - 3 次,去除残留 PMA,避免过度刺激细胞。更换为新鲜无 PMA 的完全培养基继续培养 24 小时以上,让细胞进一步成熟稳定。可借助免疫荧光检测巨噬细胞标志性蛋白 CD14、CD68 表达来验证分化成效,流式细胞术也能精准定量分析分化比例。 成功用 PMA 诱导 THP - 1 分化...
THP-1细胞系是一种人类白血病衍生的单核细胞系,广泛用于研究人类原代巨噬细胞功能。这个细胞系是非贴壁的,可以在体外分化成巨噬细胞和树突状细胞。为了诱导THP-1细胞分化成巨噬细胞,通常使用佛波醇 12-肉豆蔻酸酯 13-乙酸(PMA)。我们实验室使用的PMA浓度为100ng/ml,诱导24~48小时后可以获得M0型巨噬细胞。诱导后...
PMA诱导分化后的细胞活力下降 🌳 问题:PMA诱导分化后,THP-1细胞的活力和增殖能力通常显著下降,分化后的细胞变得更脆弱,处理不当可能导致细胞死亡率增加。 解决方法: 小心处理分化后的细胞,避免过度吹打或强烈物理刺激。 使用适当的PMA浓度,尽量避免过量刺激,以减少对细胞活力的损害。 适时换液,保证细胞有足够的营养...
可以通过特定的化学诱导剂如佛波酯(PMA)诱导分化为巨噬细胞。这些分化后的巨噬细胞可以进一步极化为M1型(促炎)或M2型(抗炎)巨噬细胞,用于研究巨噬细胞在炎症反应、免疫调节和抗肿瘤等方面的功能。 ➢炎症模型 THP-1细胞来源的M1型巨噬细胞是一种典型的炎症模型,能够通过合成和分泌促炎因子如IL-1β、IL-6、...
THP-1可以被诱导分化为巨噬细胞M1和M2，并释放相应的细胞因子[1,2]；THP-1首先被佛波酯（PMA）诱导分化为巨噬细胞，随后进行下一步极化：巨噬细胞M1极化：通过脂多糖(LPS)和IFN-γ诱导M1极化，释放出TNF-α、IL-6等细胞因子，这是典型的炎症模型。巨噬细胞M2极化：通过 IL-4 、IL-13和巨噬细胞集落刺激...
(3)最后,在无刺激物和无PMA的情况下,用无血清RPMI-1640基础培养基重悬细胞,可保持72h。 巨噬细胞进一步诱导成M2型实验步骤: (1)诱导培养基的配置:向1640完全培养基(含胎牛血清)里加入PMA(诱导浓度:100ng/mL)、加入IL-4(诱导浓度:20ng/mL)(abs04698)、IL-13(诱导浓度:20ng/mL)(abs04079)制成诱导培养基...
探讨了在细胞培养领域中关于THP-1细胞的培养与巨噬诱导过程，以及在这一过程中所遇到的挑战与解决方法。首先，展示了THP-1细胞在PMA诱导下24小时后，巨噬标志物表达显著提升，CD11b表达高达55倍的实验结果，引出了半年的期待与喜悦。这一成果的取得，虽然还有更长的研究道路要走，但它标志着细胞培养的...
首先，让我们通过实验数据来直观展示THP-1细胞在诱导24小时后的巨噬标志物表达变化。CD11b表达水平显著提高，达到了惊人的55倍，这表明在PMA诱导下，THP-1细胞成功转化为了巨噬细胞。在长达半年的探索与尝试后，我们终于迎来了这一激动人心的成果。这一过程虽充满艰辛，但令人欣慰的是，细胞培养成功，...