THP-1细胞为悬浮细胞且具有低密度依赖性,一般超过10^6/ml传代,比例一般为1:3/1:4,因此目前利用的两种传代方式: (1)半换液传代(不用离心):吸取培养瓶或者培养皿中的细胞移至新的培养瓶或者培养皿中,补足培养基2-3ml。 (2)传统的离心传代:将瓶子或皿中的细胞吸取至15mL离心管中,700-800rpm,离心5min;弃...
THP-1细胞可以用于3D细胞培养、免疫系统紊乱、免疫学和毒理学研究，也是一种合适的转染宿主。THP-1细胞培养注意事项 THP-1细胞悬浮圆形生长，偶有小聚团，属于正常现象，无需吹散；圆形透亮、细胞膜完整的细胞是活细胞，如果无法判断，可以取少量细胞用台盼蓝染色后计数确定细胞活率；少量细胞附着瓶底属于正常现象，...
1.不要打开培养瓶盖,将细胞放入 37℃培养箱中静置 3-4 小时后再做处理,以稳定细胞状态。 2.通过离心的方式收集细胞,然后将细胞沉淀加入5-8ml的完全培养基轻轻吹打均匀后移入新的T25培养瓶中培养。 培养时的注意技巧 换液前将培养瓶竖在培养箱静置1小时左右,轻轻吸掉3ml左右培养基,然后加入3ml的新鲜完全培养...
6. 同时准备1个新的T25培养瓶,加入5mL完全培养基 7. 去上清,新鲜培养基重悬细胞后滴加到步骤6的培养瓶里,放入培养箱 小贴士:THP-1细胞复苏后通常需要3-5天恢复状态,建议复苏后48小时内不要进行操作。 细胞冻存 细胞冻存步骤 1. 预先配制好冻存液 【推荐海星HyCyte™一步冻存液(即用型、无血清、无需...
2. 离心法：离心后计数，按照40-50万细胞/mL的密度接种到T25瓶里，瓶中培养基量以5mL为宜。不方便计数时，按1:2比例传代。小贴士：细胞碎片较多的情况下，建议用离心法传代，离心转速可适当降低（推荐800~1000rpm或160~200g）。THP-1细胞传代时机 培养攻略之冻存篇 冻存步骤：Step1：预先配制好冻存液 Ste...
4. 传代方式:THP-1有密度依赖性,且在偏酸性的环境中生长良好,常通过半换液的方式进行换液以及传代。 注意: (1)博主的经验是一个T25 flask静置后铺展为一层均匀细胞至90%(约900万细胞),可吹匀后直接进行1:2传代,1-2天即可再次传代。博主一般1:2传代后补完全培养基至4-5mL,24小时后若细胞状态良好,且暂...
1. THP-1细胞在偏酸性环境中生长更快，所以当培养基稍微变黄（呈橘红色）时，是适合细胞生长的，此时补液或半换液即可；2. THP-1细胞培养液中需添加β-巯基乙醇（细胞培养级别），若不添加，可能会对细胞状态造成影响；3. THP-1细胞比较难复苏，复苏初期细胞生长缓慢且会有部分细胞破碎，出现黑色细胞碎片，少量...
方法/步骤 细胞培养:THP-1细胞培养于含有10%FBS+1%P/S的RPMI-1640培养基中,培养环境为37℃,5%CO2。可以每隔3-4天加一些新鲜的培养基,或直接传代。 细胞传代:当细胞密度达到约8x10^5cells/ml左右时,即可进行传代。由于是悬浮细胞,可直接将细胞吸出,离心之后传代。传代最少浓度不应少于1x10^5 cells/ml。
首先，了解一下THP-1的基本信息。图1 THP-1细胞生长正常图片 细胞复苏：1) 准备工作：将完全培养液置37℃水浴锅预热30分钟。2)在超净台内吸取7 mL完全培养液至15 mL离心管中 3)将细胞从干冰里取出，用镊子夹住盖子放入37℃水浴中快速晃动（注意：水不能没过盖子），使其在1分钟左右完全融化；4)将细胞悬液...
一、培养方法: 1.培养基:使用含有10%胎牛血清(FBS)的RPMI 1640培养基,确保无菌且不含抗生素。 2.细胞接种:以每孔1×10^5个细胞接种到96孔板,在37℃、5%二氧化碳的细胞培养箱中培养。 3.培养时间:通常情况下,每2-3天更换一次培养基,根据细胞生长情况决定传代时间。 4.细胞传代:当细胞达到 80%-90%汇合时...