Tips:悬浮细胞通常都偏脆弱,注意控制吹打力度尽可能轻柔和离心转速以及时间不要过高,避免细胞受机械损伤。直接分瓶法:1. 取少量细胞悬液进行计数确定细胞密度,密度80w/mL以上传代,并根据计数结果确定传代比例;2. 轻轻摇晃培养瓶,使细胞均匀分散;3. 用移液器吸取培养瓶内细胞悬液,均分到若干个新培养瓶...
值得注意的是,THP-1是悬浮细胞且喜欢酸性环境,它的补液、传代方法与贴壁细胞大有不同,究竟有什么不一样呢?跟着小源来了解一下吧!首先,了解一下THP-1的基本信息。图1 THP-1细胞生长正常图片 细胞复苏:1) 准备工作:将完全培养液置37℃水浴锅预热30分钟。2)在超净台内吸取7 mL完全培养液至15 mL离心管...
THP-1细胞(人单核细胞白血病细胞)是从一名患有急性单核细胞白血病的1岁小男孩的外周血中分离得到的,THP-1细胞被广泛用于单核细胞和巨噬细胞相关的机制、信号通路以及营养和药物运输等研究,是研究免疫和炎症的理想工具。PART 01 THP-1细胞形态 细胞生长状态:THP-1细胞是悬浮生长并形成松散的团块,几乎没有细胞...
THP-1细胞悬浮圆形生长,偶有小聚团,属于正常现象,无需吹散; 圆形透亮、细胞膜完整的细胞是活细胞,如果无法判断,可以取少量细胞用台盼蓝染色后计数确定细胞活率; 少量细胞附着瓶底属于正常现象,可将悬浮细胞转移至新瓶,丢弃贴壁的细胞; THP-1喜欢偏酸环境,培养基呈橘色时可不用换液,补充适量新鲜培养基维持一天再...
1. 由于THP-1是悬浮细胞,更易受到冻存影响,建议加大冻存密度,大约200万-300万/mL为宜,以提高复苏存活率。2. 没有程序降温盒的同学,可以选择非程序冻存液(使用前咨询试剂商是否适用于THP-1),或者按照【4℃ 20min→-20℃ 30min→-80℃ 过夜→液氮保存】的顺序手动梯度降温。培养攻略之复苏篇 复苏...
THP-1细胞系最初来自一位急性单核细胞白血病患者的血液,属于悬浮细胞,有分化为多种巨噬细胞的能力,成为巨噬细胞分化的不二之选。THP-1细胞可通过化学物质处理、细胞因子刺激或共培养等方法,诱导其分化为具有巨噬细胞特性的细胞群。机理 细胞因子刺激是一种常见的THP-1细胞诱导分化方法。IL-4和IL-13等细胞因子...
THP-1细胞系是1980年Tsuchiya等人建立的人单核细胞白血病细胞系。它来自一位急性单核细胞白血病患者的血液,有分化为多种巨噬细胞的能力,是各领域研究常用的细胞系之一。 THP-1是人外周血的单核细胞系,最初来源于急性单核细胞性白血病患者。属于悬浮细胞,适合用于转染或感染实验。其表面抗原HLA型为:A2,A9,B5,DRw...
因为thp-1是悬浮细胞,易受到冻存的影响,所以需要在冻存时加大细胞密度以提高复苏细胞的存活率,建议冻存时细胞密度至少在2×106~5×106个细胞/mL。 复苏时,若对冻存细胞数量不确定,可将细胞复苏至6孔板的单孔中,待细胞状态恢复后再转移至更大体积的培养瓶中继续培养。
1. 由于THP-1是悬浮细胞,更易受到冻存影响,建议加大冻存密度,大约200万-300万/mL为宜,以提高复苏存活率。 2. 没有程序降温盒的同学,可以选择非程序冻存液(使用前咨询试剂商是否适用于THP-1),或者按照【4℃ 20min→-20℃ 30min→-80℃ 过夜→液氮保存】的顺序手动梯度降温。
THP-1细胞为悬浮细胞,相比于ML-2、HL-60、U937等白血病细胞系,THP-1细胞具有更接近于人原代单核细胞的形态和功能特征(包括细胞分化标记)。并且相对于人外周血单核细胞(PBMC),THP-1更易在实验室中培养和扩增,且具有更稳定的基因背景,不存在PBMC的个体差异性问题,利于实验结果的重现。因此,THP-1是各大...