在进行SDS-PAGE电泳时,使用合适的上样缓冲液至关重要。以下是一个简单而有效的5xSDS-PAGE Loading Buffer的配方,帮助你更好地分离和可视化蛋白质。📏 配方组分: 250mM Tris-HCl(pH 6.8) 10%(W/V) SDS 0.5%(W/V) BPB 50%(V/V) 甘油 5%(W/V) β-巯基乙醇🔬 配制步骤: 将1.25mL 1M Tris-HCl、...
2、按照上面配方制SDS-PAGE凝胶,安装好电泳仪,在槽中加入电极缓冲液。 3、按一定顺序在加样孔中加入样品。 4、打开电源将电压调到80v,待样品跑过压缩胶后将电压调到120v至样品电泳到胶底部为止。 5、将凝胶小心取下放入容器中,加入染色液,用摇床摇2-3h 6、待条带清晰后倒出染色液,加入脱色液过夜 7、将脱色...
（参照《分子克隆》二版P884）0.01 MNaOAc (pH5.2) 参照此配方配制。5×Tris-Glycine Buffer（SDS-PAGE电泳缓冲液）组分浓度：0.125 M Tris, 1.25 M Glycine, 0.5%(W/V) SDS 1．称量下列试剂置于烧杯中。2．加入约900 ml去离子水搅拌溶解。3．定容至1L，室温保存。（参照《分子克隆》二版P884）Tra...
2O溶解,浓盐酸调pH至,定容至100 mL;4)4分别胶缓冲液:溶于1.5M Tris-HCl(pH,定容至100mL; 5)4浓缩胶缓冲液:溶于1M Tris-HCl(pH,定容至100mL; 6)10电泳缓冲液(pH:Tris 3.029g,甘氨酸14.415g,SDS 1g加ddH 2O溶解,定容至100mL; 7)10%过硫酸铵(Aps,现配):1g AP加ddH 2O至10mL; 8)2 SDS电泳...
SDS-PAGE缓冲液配方TBS(pH 7.6)缓冲液配制方法: Tris-base(50mM.)6.05g NaCI(150mM)8.78g 双蒸水加至800ml 用HCl(1N)或NaOH(1N)将pH调至7.6,最后双蒸水加至1000ml。 TBST洗液液配制方法: TBS(pH 7.6)1L Tween-20(0.05%)0.5ml 5%脱脂奶粉配制方法(不含NaN3):(封闭液,一抗、二抗稀释液) TBST200ml...
SDS非连续电泳缓冲液配方 配好胶,电泳成功了一半 前置知识:SDS-PAGE电泳的凝胶主要分为浓缩胶和分离胶。 ●浓缩胶:又称堆积胶,特点是凝胶浓度小、凝胶孔径较大。样品在浓缩胶上,会因为大孔径的凝胶迁移作用而被浓缩至同一条狭窄的区带上。从而使得样品在分离胶中能够高分辨率地分离。
SDS-PAGE电泳溶液的配置 1、5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液 试剂 浓度 称重 备注 Tris 0.125 M 15.1g 加入800 ml的双蒸水溶解, 定容至1 L,室温保存 甘氨酸(Glycine) 1.25 M 94g SDS 0.5%(W/V) 5g 2、染色液 试剂 浓度 称重 备注 乙醇 25%(V/V) 250 mL 双蒸水溶解,定容至1 L,滤纸过滤后,室温保存 ...
(6)10×电泳缓冲液,1000 mL: 称取10 g SDS,30 g Tris base,144g 甘氨酸(事先要明确甘氨酸溶液的颜色,选用溶解后澄清无色的产品)于1000 mL的烧杯中,加水约700 mL溶解,可微波炉加热(< 80℃)以促进溶解,注意不要使其沸腾,加热至烧杯烫手即可...
电泳缓冲液可以回收,回收后可再使用1-2次,但为了取得最佳的电泳效果,应使用新电泳液5 >SDS-PAGE 加样缓冲液-5 S0S-PAGE Loading Buffer 【组分浓度】0.25MTris-HCL(pH6.8);10%(W/V)SDS ;0.5%(W/V) BPB(溴酚蓝);50%(V/V)甘油;5%(W/V) B -巯基乙醇(2-ME)各种组分名称配制不同体积所需各成分...