SDS-PAGE的染色剂和洗脱剂是什么 相关知识点: 试题来源: 解析 考马斯亮蓝 R250染液:1L=1g考马斯亮蓝 R250+水650ml+异丙醇250ml+冰醋酸100ml 脱色液:1L=水850ml+乙醇50ml+冰醋酸100ml 分析总结。 1l1g考马斯亮蓝r250水650ml异丙醇250ml冰醋酸100ml...
sds-page 试剂配制 SDS-PAGE 试剂配制 凝胶脱色染色方法:溶液1:无水乙醇250mL,冰醋酸50mL,水200mL;溶液2:无水乙醇50mL,冰醋酸37.5mL,水437.5mL;溶液3:0.25g考马斯亮蓝R-250 溶于100mL 95%乙醇中,滤纸过滤,待用。电泳结束,取出胶放在胶盒中,加约50mL溶液1,微波炉加热1min,摇床摇10-20nin;...
2、按照上面配方制SDS-PAGE凝胶,安装好电泳仪,在槽中加入电极缓冲液。 3、按一定顺序在加样孔中加入样品。 4、打开电源将电压调到80v,待样品跑过压缩胶后将电压调到120v至样品电泳到胶底部为止。 5、将凝胶小心取下放入容器中,加入染色液,用摇床摇2-3h 6、待条带清晰后倒出染色液,加入脱色液过夜 7、将脱色...
染色液请倒入专用的回收容器内。以自来水小心地淋洗凝胶冲去剩余染料,然后倒入适量的脱色液,微波加热至刚沸腾后于染色摇床上摇动约10 min,倒掉脱色液,此时凝胶的蛋白条带即可看清。重复以上脱色步骤一次,即可看清电泳条带。扫描凝胶蛋白条带需要完全脱掉背景颜色,这...
工作时用的是1×SDS-PAGE电泳缓冲液。九、考马斯亮蓝R-250染色液的配制1、往1g考马斯亮蓝R-250中加入250ml异丙醇,在磁力搅拌器上搅拌六小时以上;2、加入650ml去离子水,磁力搅拌器搅拌过夜;3、再加入100ml冰醋酸进行溶解,磁力搅拌器搅拌;4、在通风橱内用滤纸进行过滤。常温保存。染色液只能反复用两次。注...
1、SDS-PAGE操作流程考染1、准备溶液30%聚丙烯酰胺溶液-30%(w/v)Acrylamide 【组分浓度】各种组分名称配制不同体积所需各成分的体积(mL)或质量(g)30%Acr-Bis(29:1)1000ml100ml29%Acrylamide(丙烯酰胺)290g29g1%BIS(N,N-亚甲丙烯酰胺)10g1g【配制方法】将29克丙烯酰胺和1克N,N-亚甲丙烯酰胺溶于总体积...
20 min 漂洗液 50%乙醇 3 min 引发液 0.02%Na2S2O3 1 min 清洗 H2O 3次/min 染色 0.5%AgNO3+0.075%甲醛 2~5 min 清洗 H2O 3次/min 显色 2.5%Na2CO3+0.05%甲醛 至显色 终止 1%乙酸 注:染色液的配制方法,40 mL ddH2O中加1 mL20%的AgNO3,再加75μL30%~40%的甲醛。©...
SDS-PAGE 操作标准药物部 SDS-PAGE 操作标准 2010.06.28 王红勋 一,电泳相关溶液的配制: 1,30%丙稀酰胺混合溶液(100ml): 丙稀酰胺 双丙稀酰胺 29g(实际可以为 29.2g) 1g (实际可以为 0.8g) 用水溶解定容到 100ml,过滤,4 摄氏度保存一个月. 2,5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液: 5× Tris base 甘氨酸 10%...
将收集的各样品加入等体积的2×SDS-PAGE Loading Buffer,煮沸裂解5min,冰浴2min,12,000rpm离心10min,取上清-20℃保存备用。 1)按照电泳装置的使用说明,装好洁净干燥的玻璃板。 2)分离胶的制备 按下列成分配制10mL 12%分离胶: 各成分加入后迅速旋涡混匀,用微量移液器将其小心地注入准备好的玻璃板间隙中,并为...