小小蔓荆子创建的收藏夹要学会的技术!内容:RT-qPCR详细步骤,如果您对当前收藏夹内容感兴趣点击“收藏”可转入个人收藏夹方便浏览
根据MIQE（Minimum Information for Publication of Quantitative Real-Time PCR Experiments）的指导方针，qPCR为Quantitative real-time PCR的简称，RT-qPCR指的是Reverse transcription–qPCR，RT-PCR仅用来表示Reverse transcription polymerase chain reaction，而不是Real-time PCR，但是有少数作者并没有坚持这一原则。
本品为针对RT-qPCR优化的逆转录试剂盒,包含gDNA去除和逆转录两管mix,使用时只需加入RNA模板并补足水即可。高浓度的8 x gDNA remover不仅预留充足的RNA加样体积(以应对低浓度的RNA),同时可以快速去除RNA样本中残留的基因组DNA,使得qPCR的引物无需跨内含子设计。试剂盒
操作步骤 1、从RNA（或mRNA）反转录合成cDNA第一链：2、于95℃加热5～10min，灭活反转录酶，使RNA—cDNA杂交体变性，然后迅速冰浴冷却：3、PCR扩增：方法基本同PCR。cDNA第一链合成方法：20ul反应液中含10xPCR扩增缓冲液，2ul；四种dNTP（10 mmol/L）2ul；RNA酶抑制剂20U；mRNA，l～2ug（或RNA 5-10ug...