RPA反应基本原理见图1,主要包含5个阶段:(1)在三磷酸腺苷供能的条件下,重组酶辅因子(Uvs Y)协助Uvs X与反应体系中的引物结合,形成酶-引物复合体,该复合体在反应体系中寻找双链DNA同源序列[3];(2)在同源序列处发生链交换反应形成D环结构...
RPA技术主要依赖于三种酶:能结合单链核酸(寡核苷酸引物)的重组酶、单链DNA结合蛋白(SSB)和链置换DNA聚合酶。这三种酶的混合物在常温下也有活性,最佳反应温度在37°C左右。 RPA技术原理: 重组酶与引物结合形成的蛋白-DNA复合物,能在双链DNA中寻找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就会发生链交换反应形成并启动DNA...
重组聚合酶等温扩增技术(recombinase polymerase amplification,RPA)是于2006年研发的一种不依赖精密仪器、可在37~42 ℃恒温、短时间内扩增目的基因的核酸扩增技术[2, 3]。将侧流层析试纸条(lateral flow strips,LFS)技术与RPA技术联合...
我国科研人员开发了常温下快速检测新冠病毒的新型PCR技术,称为逆转录重组酶聚合酶扩增(RTRPA)技术,原理见下图。重组酶与引物结合,使模板DNA无需变性即可与引物结合。子链延伸的过程中,被置换出的非模板链与单链结合蛋白暂时结合。下列关于RTRPA的叙述错误的是( )...
RPA 技术原理 RPA 体系的重点是重组酶,这些酶与寡核苷酸引物形成复合体,并使引物与双链 DNA 中的同源序列配对。单链 DNA 结合(SSB)蛋白与被取代的 DNA 链结合,并使形成的 D 环保持稳定。然后从引物启动由聚合酶介导的 DNA 扩增,但前提是存在靶标序列。一旦启动,扩增反应将快速进行,因此开始时只需一点靶标 ...
RPA:主要依赖于三种酶:能结合单链核酸(寡核苷酸引物)的重组酶、单链DNA结合蛋白(SSB)和链置换DNA聚合酶。 重组酶与引物结合形成的蛋白-DNA复合物,能在双链DNA中寻找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就会发生链交换反应形成并启动DNA合成,对模板上的目标区域进行指数式扩增。被替换的DNA链与SSB结合,防止进一步替换...
我国科研人员开发了常温下快速检测新冠病毒的新型PCR技术,称为逆转录重组酶聚合酶扩增(RTRPA)技术,原理见图。重组酶与引物结合,使模板DNA无需变性即可与引物结合。子
【详解】A、PCR技术的原理是DNA复制,新冠病毒的遗传物质是单链RNA,所以需要有逆转录酶将新冠病毒RNA逆转录为cDNA,才能进行RTRPA技术,A正确;B、引物是与目的基因的一段核苷酸序列互补配对的,所以引物能与新冠病毒cDNA的特异性序列互补配对,B正确;C、结合题图分析可知,重组酶与引物结合后,模板DNA无需变性即可与引物...
RPA:主要依赖于三种酶:能结合单链核酸(寡核苷酸引物)的重组酶、单链DNA结合蛋白(SSB)和链置换DNA聚合酶。 重组酶与引物结合形成的蛋白-DNA复合物,能在双链DNA中寻找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就会发生链交换反应形成并启动DNA合成,对模板上的目标区域进行指数式扩增。被替换的DNA链与SSB结合,防止进一步替换...