一、原理 HPLC RP法是基于样品与固定相之间的亲疏水性相互作用来进行物质分离的。常用的固定相是疏水性的烷基链,如C18。当样品溶液通过固定相时,极性物质会与固定相表面发生亲和作用,从而被滞留,而非极性物质则会较快地通过。通过调节流动相的成分和流速,可以实现对不同化合物的分离。 二、操作步骤 1. 样品制备...
2. 原理 HPLC RP法基于样品溶液中化合物的亲水性和疏水性之间的相互作用进行分离。在RP柱中,固定相通常是一种疏水性的材料,如C18矽胶。样品中的化合物会与固定相发生相互作用,疏水性的化合物与固定相相互作用较强,因此在柱中停留时间较长;而亲水性的化合物与固定相相互作用较弱,因此在柱中停留时间较短。通过调...
反相高效液相色谱法(RP-HPLC)是一种常用的分离分析方法,基于高效液相色谱技术,采用非极性固定相和极性流动相的组合,实现样品的分离和检测。原理 在RP-HPLC中,样品在非极性固定相和极性流动相之间的分配作用实现分离。组分在固定相和流动相之间的溶解度差异导致不同的迁移速度,从而实现分离。发展历程和应用领域 ...
反相高效液相色谱法(RP-HPLC)使用亲水性的固定相和疏水性的移动相,利用样品分子在移动相和固定相之间的互作用力差异进行分离。一、基本原理:1.疏水性固定相:反相色谱柱通常使用疏水性的固定相材料,如疏水链状碳氢化合物改性的硅胶或封闭的C18链,使分析物在移动相中具有亲水性,与固定相表面发生疏水...
•RP-HPLC简介•RP-HPLC的原理与技术•RP-HPLC的优缺点•RP-HPLC的实际应用•RP-HPLC的未来发展•RP-HPLC实验操作注意事项 01RP-HPLC简介 定义与特点 定义 反相高效液相色谱法(ReversePhaseHighPerformanceLiquidChromatography,简称RP-HPLC)是一种常用的分离分析技术,利用反相色谱柱将样品中的各组分进行...
RP-HPLC的典型的固定相是十八烷基键合硅胶,典型的流动相是甲醇和乙腈。RP-HPLC是当今液相色谱的最主要的分离模式,几乎可用于所有能溶于极性或弱极性溶剂中的有机物的分离。 反相色谱法适于分离非极性、极性或离子型化合物,大部分的分析任务皆由反相色谱法完成。
在RP-HPLC中,对于可电离的化合物,流动相的pH会影响其电离状态从而改变其疏水性,进而影响其保留。在碱性化合物的反相分析中,当考虑用离子对方法时,需要确保化合物处于完全的质子化,也就是充分带上正电荷,这样才能和离液剂阴离子充分作用。在满足这个要求下,离液效应和pH关系不大。由于很多离液阴离子(如高氯酸根离...
论文标题: RP-HPLC法同时测定半夏糖浆中乙酸和琥珀酸的含量 英文标题: 中文摘要: 目的:建立同时测定半夏糖浆中乙酸和琥珀酸含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法。色谱柱为GL InterSustain-C18,流动相为0.03 mol/L磷酸二氢铵缓冲液(pH2.0)-甲醇(梯度洗脱),流速为0.8 ml/min,检测波长为210 nm,柱温为30 ...