三、电子顺磁共振法电子顺磁共振法(Electron Paramagnetic Resonance,EPR)是一种基于活性氧的自旋共振信号进行检测的方法。该方法利用活性氧的自旋共振特性,通过外加磁场和微波辐射,使活性氧的自旋共振信号被放大并检测。该方法具有高度的特异性和灵敏度,可以用于直接检测生物体内的活性氧。在活性氧检测中,常用的EPR...
1. 化学发光法化学发光法是一种常用的检测ROS的方法。该方法利用ROS与特定的化学发光剂反应,产生光信号。由于ROS与化学发光剂的反应是瞬时的,因此该方法可以快速检测ROS的产生。常用的化学发光剂包括三羟甲基氨基甲烷、荧光素和Lucigenin等。2. 电子自旋共振(ESR)电子自旋共振是一种检测ROS的方法,特别是对于超氧...
三、活性氧(ROS)的检测方法目前针对ROS的检测方法有荧光染色法、电子顺磁共振技术(EPR)、化学发光法、色谱法、分光光度法、电化学生物传感器和基于荧光蛋白等7种方法,今天主要讲解一下荧光染色法检测细胞内ROS的原理及操作步骤。四、检测原理目前利用荧光染色法检测细胞内ROS最常用的是DCFH-DA荧光探针法。DCFH-DA(...
在有氧呼吸中,线粒体中的电子传递链复合物将电子传递给 O2,有一部分 O2 被还原,主要包括:超氧化物 (O2-);过氧化氢 (H2O2);单线态氧 (1O2);羟基自由基 (HO.);氢过氧自由基 (ROO.);氧化物过氧亚硝基阴离子 (ONOO-) 等。 ROS活性氧是从哪里产生的?动物细胞中活性氧(ROS)的三种来源:线粒体呼吸链、...
目前针对 ROS 的检测方法主要有荧光染色法、电子顺磁(自旋)共振技术(Electron paramagnetic (spin) resonance, EPR/ESR)、化学发光法、色谱法、分光光度法、电化学生物传感器和基于荧光蛋白等。 表1. 检测/定量活性氧的方法 (不同环境)[5]。 ▐特定 ROS 检测方法 ...
活性氧含量检测试剂盒通过使用特异性探针或底物与ROS发生化学反应,从而实现对ROS含量的测定。这种检测方法基于探针或底物与ROS的特异性反应,通常使用荧光分光光度计或流式细胞术进行测量。活性氧含量检测试剂盒具有以下几个优势: 1. 高选择性:活性氧含量检测试剂盒能够特异性地检测ROS,避免了其他化学物质的干扰,确保测...
细胞内羟基自由基(•OH)的检测对于理解适当的细胞氧化还原调节以及其失调对各种病理的影响至关重要。羟基自由基是活性氧(ROS)中的一种,可与其他分子高度反应以实现稳定性。一般而言,羟基自由基被认为是氧化代谢的有害副产物,可对生命系统造成分子损伤。它的平均寿命为10-9纳秒,几乎可以与所有生物分子发生反应,例如...
实验采用Thermo CellROX® Assay Kit,针对Jurkat E6-1细胞,设计三组对照试验:1. 阴性对照(健康细胞不处理) 2. TBHP处理的细胞 3. NAC预保护、TBHP 处理的细胞。使用Moxi Go II检测每组细胞活性氧生成情况。结果输出界面如下: 由图知Moxi Go II支持输出散点图(CellROX® Orange荧光强度 vs直径)和直方图(细胞...
本方法规定了化妆品用化学原料光反应性活性氧(ROS)测定试验的基本要求和方法。本方法适用于预测化妆品用化学原料的潜在光毒性。化妆品注册备案检测,欢迎致电:4006160084 实验目的 预测化妆品用化学原料是否具有潜在光毒性。化妆品注册备案检测,欢迎致电:4006160084 试剂和材料 除另有规定外,本方法所用试剂均为分析...
传统的ROS检测通常采用荧光强度方法,如ORAC、DCF等,都采用无荧光现象的底物,在活性氧的作用下生成新的物质,同时具有荧光现象,因此通过检测荧光强度可以检测出ROS水平,适宜于细胞水平的检测。 常规的细胞水平实验检测方法是非均相的方法,并且倾向于活细胞的检测,并需要不同...