多数的siRNA表达载体依赖RNA聚合酶III 启动子(pol III)中的一种，操纵一段小的发夹RNA(short hairpin RNA, shRNA)在哺乳动物细胞中的表达。这三类启动子包括大家熟悉的人源和鼠源的U6启动子和人H1启动子。之所以采用RNA pol III启动子是由于它可以在哺乳动物细胞中表达更多的小分子RNA，而且它是通过添加一串（3...
多数的siRNA表达载体依赖RNA聚合酶III 启动子(pol III)中的一种,操纵一段小的发夹RNA(short hairpin RNA, shRNA)在哺乳动物细胞中的表达。这三类启动子包括大家熟悉的人源和鼠源的U6启动子和人H1启动子。之所以采用RNA pol III启动子是由于它可以在哺乳动物细胞中表达更多的小分子RNA,而且它是通过添加一串(3到6...
由于释放的内含子也包含可以通过 RtcB 连接的 5' 和 3' 末端,因此可以将内含子环化(补充图1a)。通过将荧光适体 Broccoli插入tRNA-Tyr 的内含子序列中,我们之前表明生成了含有环状Broccoli的内含子。 然而,在这个称为“tricY”的系统中,环状Broccoli的水平仅略高于由相同U6 启动子表达的线性Broccoli。基于高水平的...
启动子。之所以采用之所以采用RNA pol III启动子是由于它可以在哺乳动物细胞中启动子是由于它可以在哺乳动物细胞中表达更多的小分子表达更多的小分子RNA 19、,而且它是通过添加一串(,而且它是通过添加一串(3到到6个)个)U来终止转录的。来终止转录的。使用这类载体,需要使用这类载体,需要2段编码短发夹段编码短发夹...
lsiRNA表达载体：依赖pol III启动子，需克隆、测序，适用于长期研究。病毒载体可用于高效率感染和稳定表达。lsiRNA表达框架（SECs）：PCR直接合成，无需克隆，适合快速筛选siRNA和启动子组合。但转染难度大，不适合长期抑制研究。RNA干扰（RNAi）技术的应用 RNA干扰（RNAi）技术以其高效性和简便性，在基因功能研究领域...
一年之后,Robert Roeder在PNAS上发表另一篇文章,指出RNA聚合酶I(Pol I)定位在核仁上,核仁正是rRNA转录的地方,而RNA聚合酶II(Pol II)、RNA聚合酶III(Pol III)则是聚合在核质内【4】。这个发现说明了不同的RNA聚合酶可能负责转录不同...
远端增强子元件通过染色体环与活性基因启动子的物理相互作用募集转录因子、染色质修饰物、中介复合体和RNA聚合酶II(Pol II),导致转录激活。启动子区和增强子的双向转录分别产生非编码启动子RNA(pRNA)和增强子RNA(eRNA)。从蛋白质编码基因座、反式作用的长非编码RNA(lncRNA)、pRNA和eRNA...
许多lncRNA因为被剪切和多聚腺苷化而被描述成“mRNA-like”。然而,其它lncRNA不是聚腺苷化或具有7-甲基鸟苷帽,它们是从Pol I或Pol III启动子表达或者是从前体加工而来,包含内含子和重复元件,导致未知功能的转录本。 对于蛋白质编码基因,lncRNA可以是 基因间,反义,或者是内含子。它们也来源于“假基因”,这种基...
利用不同α-鹅膏蕈碱浓度处理细胞,检测所转录出来的RNA,他们发现:rRNA是由Pol I转录出来的;Pol II能够合成腺病毒的pre-mRNA,而Pol III则能够转录5S RNA、tRNA以及腺病毒的VA RNA【5,6】。与此同时,Roeder实验室从小鼠浆细胞瘤中纯化三种RNA聚合酶的不同亚基,发现三种聚合酶的亚基组成有很大区别。这说明真核...