压线细胞计左不计右,按照公式:细胞数/ml:4个大格子细胞总数/4 ×稀释倍数例如:细胞重悬为2ml,稀释20倍,铺6孔板,每孔大约200万个细胞则:四个大方格计数分别为36,38,39,48,则平均数为40.25,细胞数目为40.25×20×10^4即大约有805万个细胞/ml。铺6孔板大约需要1200万个细胞/2ml,则将取样误差计算在内:
朋友,你这次的RNA提取实验似乎并未成功。从结果来看,这并不是我们期望的5S条带,更像是RNA完全降解了。恐怕你得重新进行这个实验了,加油!
这个还是RNA的28和18降解为5s导致的5s处很亮。如果是23s 和 16s 降解,它们的条带没有拖尾,这又是...
跑RNA电泳时,最前面的是28s亚基,完整的应该有三条带,分别是5s,18s,28s。其中5S最暗,28S最亮! 跑RNA 电泳时应该换成新的电泳液,
对于真核生物来说,完整的RNA有3个条带:28S条带最亮,其次是18S条带,5S条带最淡(有些试剂盒提取RNA的过程会将5S条带过滤掉)。通过琼脂糖凝胶电泳检测28S、18S的条带亮度比值评估RNA的纯度和完整性。 若28S和18S条带清晰、明亮、锐...
因此,在RNA电泳图中,我们主要关注28s和18s这两条带,而代表microRNA的5s带通常要么不存在,要么亮度很弱。这也是目前各公司总RNA提取试剂盒中“总RNA”概念的一种体现。以下是一张不同降解情况下的典型RNA电泳图(采用RNA吸附柱法)。泳道2展示了完全正常的RNA,其中28s与18s的比例大约为2:1,且在5s位置几乎...
由于RNA在肉眼中是不可见的,在凝固过程中,一种夹层染料如溴化乙锭(EtBr)被纳入凝胶中。这与RNA结合,并在紫外线下发出荧光,从而使RNA片段可以被观察到。存在的RNA越多,条带就越亮。图3:琼脂糖凝胶电泳实验发亮条带 于是在琼脂糖凝胶电泳之后,由于5SrRNA、18SrRNA和28SrRNA分子量大小不同,迁移速率不同,...
1)完整的RNA通常会有三条带,有的也会两条带(有些试剂盒提取的时候会过滤掉5S条带) 2)最亮的条带为28S条带,其次为18S条带,最淡条带为5S条带;28S条带亮度应为18S条带亮度的2倍左右。 通常在我们得到的电泳结果也会出现多种异常现象,如下: RNA条带降解 RNA降解 降解可能出现在提取过程或电泳过程。建议...
rna-条带分析一.RNA条带分析: 要知道RNA电泳的理想带型是: 1.完整的RNA琼脂糖电泳会有三条带,某些试剂盒可能会有两条带(没有最下面的5S条带)。 2.上面两条带应该最亮,分别代表28S和18S rRNA,且第一条带(28S)亮度应为第二条(18S)亮度的约2倍。最下面一条带最淡,为5S条带。3.如果你发现最下面一...