3.将凝胶放入电泳槽中,加入恰好没过胶面1mm深的足够电泳缓冲液,预电泳10min。 4.每份限制酶切产物取10μl,加2μl 6×上样缓冲液,混匀后加入到样品孔中,以100V 电泳50分钟。 5.断电后取出凝胶,放在紫外透射仪中观察并记录PCR—RFLP结果。 【实验结果与分析】 根据甲型血友病患者及其相关成员的亲属关系绘制...
试述RFLP和PCR-SSCP的具体实验过程。相关知识点: 试题来源: 解析 RFLP操作过程: (1)提取样本的Total DNA (2)酶切 (3)电泳---胶处理 (4)转膜 (5)杂交 (6)放射自显影 (7)结果分析SSCP基本过程: ①PCR扩增靶DNA; ②将特异的PCR扩增产物变性,而后快速复性,使之成为具有一定空间结构的单链DNA分子; ③...
应用PCR— RFLP,可检测某一致病基因已知的点突变,进行直接基因诊断,也可以此为遗传标记进行连锁分析进行间接基因诊断。 本实验以家族性甲型血友病患者及其相关成员外周血DNA为模板,PCR扩增凝血因子FⅧ基因的583bp特异片段产物,其中包含MspⅠRFLP多态位点,经MspⅠ酶切后,琼脂糖凝胶电泳检测等位片段的长度(583bp或360bp+...
二、实验原理 第一代分子遗传标记RFLP是根据不同品种(个体)基因组的限制性内切酶的酶切位点碱基发生突变,或酶切位点之间发生了碱基的插入、缺失、重排等,导致酶切片段大小发生了变化,这种变化可以通过PCR,酶切及琼脂糖凝胶电泳进行检测,从而可比较不同品种(个体)的DNA水平的差异(即多态性),RFLP已被广泛用于基因组...
rflppcr扩增牟隆复制条件片段 【实验原理】PCR-RFLP【实验原理】聚合酶链式反应(PCR)是模拟体内DNA复制条件在体外酶促合成特异DNA片段的循环反应,可使目的DNA片段得以迅速扩增。其主要步骤是:将待扩增的模板DNA置于高温(约93℃-95℃)下使之变性解链;人工合成的两个寡核苷酸引物在低温(约50℃-70℃)下分别与目的DNA...
本实验PCR 产物长度为379bp,rs17750303 位点位于140bp 处,为A/C突变。rs837690 位点位于175bp处,为AG 突变。两个位点均为BstN I 酶识别部位,酶切后可以产生1-4(6 种)个DNA 片断,根据酶切片段数量与长度可出现10 种谱型(基因型组)见下表。
你好!你描述的情况,两种是不同的实验方法,PCR-RFLP这种实验方法与RFLP相比,不同的是以扩增替代了酶...
实验四 PCRRFLP基因分型实验内容CONTENTS01实验目的02实验原理03实验仪器与试剂04实验步骤05结果与分析0607实验结果处理思考题一实验目的1.熟悉PCRRFLP分析技术原理及实验步骤;2.掌握限制性核酸内切酶消化DNA的
PCR-RFLP实验步骤主要包括哪些? 参考答案: 基因DNA提取、设计引物、选择内切酶、扩增目的基因、内切酶消化PCR产物以及电泳后分析等。您可能感兴趣的试卷你可能感兴趣的试题 1.问答题简述MLPA的特点 参考答案: 1.灵敏度高 2.特异性和重现性高 3.检测分辨率宽。 4.方法简便(快速检测非整倍体异常) 2.问答题简述...
[整理版]PCR-RFLP 【实验原理】聚合酶链式反应(PCR)是模拟体内DNA复制条件在体外酶促合成特异DNA片段的循环反应,可使目的DNA片段得以迅速扩增。其主要步骤是:将待扩增的模板DNA置于高温(约93℃-95℃)下使之变性解链;人工合成的两个寡核苷酸引物在低温(约50℃-70℃)下分别与目的DNA片段两侧的互补序列复性结合...