为了确保qPCR实验的准确性和可重复性,下面是一份qPCR标准操作规程,共计1200字。 一、实验前准备 1. 温控设备:确保可靠的样品温度控制,通常使用PCR机或实时荧光定量PCR仪。 2. 实时荧光定量PCR仪:根据实验目的选择合适的仪器,同时确保其正常工作状态。 3. 质控:准备质控样品,用于验证实验的准确性和可靠性。 4. ...
QPCR 标准操作流程一、 QPCR 原理所谓实时荧光定量PCR 技术,是指在PCR 反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR 进程,最后通过标准曲线对未知模板进行绝对定量分析或通过内参对比进行相对定量分析的方法。本实验室常采用 8、相对定量进行分析。1. SYBR Green :在 PCR 反应体系中,加入过量SYBR 荧光染料...
标准的-定量Q-PCR仪器的具体使用步骤和操作方法 Q-PCR仪器使用具体步骤 1. 首先将Mx3000P电源打开,大约1min,将会听到启动的声音。然后打开桌面上的“Mx3000P软件”,确定软件界面右下面的联机标志呈绿色。如果不是绿色而是红色,软件会提示Instrument to PC communications have failed ,这时只需稍等片刻,待仪器自检...
QPCR标准操作流程 一、QPCR原理 所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行绝对定量分析或通过内参对比进行相对定量分析的方法。本实验室常采用相对定量进行分析。 1. SYBR Green: 在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特...
1、总RNA提取及反转录标准操作流程一、仪器试剂Trizol试剂三氯甲烷4预冷异丙醇4预冷75%乙醇DEPC处理水配置4预冷DEPC处理水/RNase free water反转录试剂盒1.5mL无酶EP管200L无酶PCR管冷冻离心机Nano Drop 2000反转录试剂盒Takara RR036A二、实验须知1. 选择人员走动较少的实验台或超净台无须翻开风机操作。2. ...
QPCR标准操作流程 一、QPCR原理 所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行绝对定量分析或通过内参对比进行相对定量分析的方法。本实验室常采用相对定量进行分析。 1. SYBR Green: 在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特...
总RNA提取及QPCR标准操作流程移除脂肪层将澄清的上清液移至新的无酶eprna提取1mltrizol溶液加入200三氯甲烷立即盖上盖子剧烈振荡15s使水相和有机相充分接触室温静置35min12000g离心15min液体分为三层rna位于上层水相约占总体积的50移的枪吸取上清吸上清时ep管倾斜大约45加入等体积异丙醇轻柔地充分混匀颠倒68次不应用...
总RNA提取及QPCR标准操作流程总 一、仪器试剂 Trizol试剂 三氯甲烷(4℃预冷) 异丙醇(4℃预冷) 75%乙醇(DEPC处理水配置)(4℃预冷) DEPC处理水/RNase free water(反转录试剂盒) 无酶EP管 200 口1.无酶PCR管 冷冻离心机 Nano Drop2000 反转录试剂盒(Takara RR036A) 二、实验须知 1.选择人员走动较少的...
总RNA提取及QPCR标准操作流程总 一、仪器试剂 Trizol试剂 三氯甲烷(4C预冷) 异丙醇(4C预冷) 75%乙醇(DEPC处理水配置)(4C预冷) DEPC处理水/RNase free water(反转录试剂盒) 1.5mL无酶EP管 200此无酶PCR管 冷冻离心机 Nano Drop2000 反转录试剂盒(Takara RR036A) 二、实验须知 1.选择人员走动较少的实验...