数字PCR 是一种新型的核酸(DNA、cDNA 或 RNA)定量技术,它采用有限稀释的方法,使用泊松分布分析数据从而得到靶标的绝对拷贝数浓度。 数字PCR 实验中,一个完整的 qPCR 反应体系(包括模板、DNA 聚合酶、引物、探针等)被分隔为若干个...
4. qPCR实验操作的差异:qPCR实验的操作过程，例如RNA提取、逆转录、qPCR反应等，如果存在差异，也会导致...
qPCR技术重复的副孔CT值差多少比较合理? qPCR技术重复的副孔是为了避免操作失误带来的数据错误。理论上,如果每一次操作都完全一致,那么CT值的差异理论上会为0,但实际操作中几乎不可能,所以我们追求的是CT值的差异越小越好。那差异应该在什么范围内才属于可以接受的结果呢? 一般情况下,一个样本会设置三个复孔,最终...
qPCR技术重复的副孔CT值差多少比较合理 本期视频的主题是qPCR技术重复的副孔CT值差多少比较合理感谢提问同学:yeah #分子生物学 #生命科学 #实验知识科普 #qPCR - EXdrive实验科普于20240614发布在抖音,已经收获了5233个喜欢,来抖音,记录美好生活!
数据来自于Illumina的单端测序,长度为42bp。分别2个ChIP-seq独立的生物学重复和2个对照生物学重复,但是一共有7份数据。因为第一组ChIP-seq还有3个技术重复,第一组对照还有2个技术重复,所以是3+1+2+1=7 。他们的ChIP-seq样本在测序之前用qPCR先进行了验证。
PCR现在已经成为大部分分子实验室的标配,无论是基因检测、基因定量、病原体检测、SNP分型等等实验,都涉及到qPCR技术。如果没有一个共同的标准来衡量荧光定量PCR实验,结果可能千差万别,后来者也难以重复出同样的结果。为此,行业资深科学家开始制定标准,RDML (Real-Time PCR Data Markup Language )——即“术语规范”...
单个样本的单个基因重复跑3个复孔，技术重复之间均一性好，意味着你的qPCR体系和操作没有问题。
qPCR三次生物学重复之间CT值差异很大，而技术重复之间差异不大，可能的原因包括：1. 样本处理差异：在不...
在qPCR实验中，如果三次生物学重复之间的Ct值差异很大，而技术重复之间的Ct值差异较小，这通常表明问题...