针对该区域设计特异性引物,建立Q-PCR或数字PCR检测方法,并进行验证 此外,病毒载体的滴度按不同层面可以分为总颗粒数、基因组滴度和感染滴度,其中基因组滴度是病毒基因组拷贝数,通常通过Q-PCR法或数字PCR法进行定量。 那么数字PCR与Q-PCR方法对比有何优势呢? 新型数字PCR技术的特点 数字PCR将批量反应分成数万纳升大...
使用针对AAV ITR-2(货号:A52740)的Applied Biosystems™ Absolute Q™病毒滴度检测试剂盒,通过dPCR进行病毒滴度定量。 QuantStudio Absolute Q dPCR试剂准备 如表1所示,为每个稀释度制备3个dPCR反应。简单来说,就是通过混合Applied Biosystems™ Absolute Q™ DNA数字PCR预混液(5X)(货号:A52490)、Absolute...
快速精确测定,无需标准曲线 Applied Biosystems QuantStudio Absolute Q 数字 PCR 系统是一种基于芯片板的数字 PCR(dPCR)平台,采用微流体阵列式芯片板(MAP)技术,可在一台仪器上完成 dPCR 所需的所有步骤——区室化、热循环和数据采集。dPCR 工作流程与您熟悉的 qPCR 工作流程相...
五、AAV病毒包装滴度测定(采用Q-PCR法) 1)取20ul 浓缩病毒液,加入1ul RNAse-free DNAse,混匀,37℃水浴反应 30min。 2)4℃,12 000 rpm/min,离心10 min,取10ul 上清到另一个无菌的1.5ml EP 管中。 3)加入90ul Dilution Buffer(1 mM Tris-HCl, pH 8.0,0.1 mM EDTA,150 mM NaCl),混匀,37℃...
根据慢病毒表达载体pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP-T2A-puro中多克隆位点选择限制性酶切位点XbaІ和BamHІ,同时插入起始密码子和终止密码子,设计上游引物5′-TCTAGA(XbaІ)GCCACCATGTTGTATGACAGTAGTTCTT-3 ′和下游引物5′-GGATCC(BamHІ)TTATGTTCCATTA...
将SARS-CoV-2以0.05的MOI感染Vero E6细胞,在不同剂量的解本10号发酵液中培养24 h,用qRT-PCR法测定细胞上清液中病毒含量。用CCK-8法测定解本10号发酵液对Vero E6细胞的毒性。 抗氧化活性研究 以活性氧(ROS)水平过高为特征的氧化应激在COVID-19的进展中起着至关重要的作用。许多证据表明,用抗氧化剂对ROS进行...
对于DNA 甲基化分析,使用Absolute Q 一步法 RT-dPCR 预混液 (4X),其不含 UNG。 相关产品 Absolute Q 液体活检 dPCR 测定试剂盒 Absolute Q 病毒滴度 dPCR 测定试剂盒 仅供科研使用。不可用于诊断程序。 规格 检测方法引物-探针 形式液体 PCR 方法数字 PCR ...
MicroRNA,shRNA, siRNA,LncRNA慢病毒包装 模板DNA合成 请咨询 载体构建 5-7 慢病毒大量包装 10-15 粗毒液纯化浓缩 2 滴度测定 5-8 感染效果WB或q-PCR评价 6-10 慢病毒稳转细胞株筛选 过表达及干扰慢病毒细胞株 基因/模板DNA合成 请咨询 载体构建 10-15 慢病毒大量包装及纯化 10-15 筛选条件确认 5-7 ...
1月11日,Nature Communications刊登了一项“Duration and key determinants of infectious virus shedding in hospitalized patients with coronavirus disease-2019 (COVID-19)”的研究,研究人员纳入了129名COVID-19患者(通过RT-PCR诊断),89例重症患者(69.0%)、40例中级患者(31.0%),其中有8例重症患者和35例中度患者...
图2 AAV基因组示意图和用于PCR筛选的位点[1] AAV病毒为无包膜结构,其病毒表面由衣壳蛋白VP1,VP2,VP3按1:1:10比例组成。衣壳蛋白的不同突变型产生了不同的AAV亚型,按血清试验结果可以分为不同血清型,目前已有13种AAV血清型(AAV1～AAV13)。而不同的AAV血清型靶向不同的受体,具有不同的组织嗜性。