从上图中可以看出,pET系列的质粒的复制子名称为pBR322,属于松弛型中低拷贝复制子,通常的拷贝数为12~20个/细胞。对于表达质粒来说,由于目的蛋白的高表达会对宿主细胞造成很大的代谢压力,因此表达质粒的拷贝数通常不是特别高。 除了复制子本身的性质,还有很多因素会影响质粒的拷贝数。比如: 1. 插入片段: 如果插入片...
名称:pET28a-SUMO 别称:pET-28a-SUMO 基因长: 规格:默认发少量干粉质粒(现货)大提液体质粒(期货) 质粒宿主:大肠杆菌 质粒用途:蛋白表达 片段类型:ORF 片段物种:空载体 原核抗性:Kan 筛选标记: 荧光标记: 启动子:T7 复制子:pBR322 拷贝数:低 感受态:DH5a ...
pet28a是低拷贝质粒,当插入GFP后,会不会影响pet28a-GFP的荧光蛋白强度? 答案 这个主要是看你的GFP蛋白表达量的,和质粒拷贝数多少并没有多大关系.表达量低了,一般是和你的诱导条件有关,你需要优化你的诱导条件.如IPTG浓度,诱导时间,诱导温度等等.相关推荐 1pet28a是低拷贝质粒,当插入GFP后,会不会影响pet28a-GF...
还是有必要的，Origin：Theoriginofreplication，由复制起始位点和相关调控元件组成，pET-28a(+)中的复制子属于松弛型中低拷贝型复制子，目标蛋白的高表达会对宿主菌造成较大的压力，所以表达载体的拷贝数通常较低。Kan：编码氨基糖苷磷酸转移酶，使质粒产生卡那霉素抗性，用于筛选培养过程中含有目标质粒的宿...
pET-28a(低拷贝)质粒载体 价格￥680 起批量≥1支 最小起订1支 供货总量50支 发货地址浙江省温州市 建议售价￥680/支 更新日期2024年12月26日 产品规格0.5ug 即时洽谈立即询价查看联系方式 收藏产品发送留言 VIP3年 温州科淼生物科技有限公司 企业认证:备 ...
Origin:The origin of replication,由复制起始位点和相关调控元件组成,pET-28a(+)中的复制子属于松弛型中低拷贝型复制子,目标蛋白的高表达会对宿主菌造成较大的压力,所以表达载体的拷贝数通常较低。 Kan:编码氨基糖苷磷酸转移酶,使质粒产生卡那霉素抗性,用于筛选培养过程中含有目标质粒的宿主菌。 Rop:编码ROP蛋白 ...
1.pET28a载体基本信息：质粒类型：⼤肠杆菌表达载体 表达⽔平：⾼ 克隆⽅法：多克隆位点，限制性内切酶 载体⼤⼩：5368bp 5' 测序引物及序列: T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3'3' 测序引物序列: T7t: 5'-GCTAGTTATTGCTCAGCGG-3'载体标签: N-His, N-Thrombin, N-T7, C-His 载体抗性：...
i. 此法制备的高拷贝数质粒(如Xf3 或 pUC),其产量一般约为:每毫升原细菌培养物 3 -5μg。 ii.如果要通过限制酶切割反应来分析 DNA,可取 1μl DNA 碱裂解法提取质粒。 质粒提取(碱裂解法) (1)取 1.5ml 菌液于 1.5mlEP 管中,12000rpm x 1min,弃去上清液.(200ul 枪头吸下) (2)加入 100ul ...
有谁知道pET-28a在大肠杆菌K-12中拷贝数是多还是少，我用pET-28a做转化但从转化子中总是提不出质粒...
i.此法制备的高拷贝数质粒(如Xf3或pUC),其产量一般约为:每毫升原细菌培养物35 科 gii.如果要通过限制酶切割反应来分析DNA,可取1 “ DNA 碱裂解法提取质粒。质粒提取(碱裂解法)(1)取1.5ml菌液于1.5mlEP管中,12000rpm x 1min ,弃去上清液.(200ul枪头吸下)(2)加入100ul溶?夜I,重悬(浑浊状)(3)向...