顾名思义,就是不需要PCR的建库过程。其文库构建的核心步骤为:基因组打断-末端修饰-加接头-文库质控。但事实上,这只能算是建库环节的PCR-Free。真正的PCR-Free,应该是从建库到测序全流程均无文库扩增的过程(例如单分子测序技术)或者无PCR扩增错误累积的测序技术(例如MGI的DNBseq)。 图1. 常规建库与PCR-Free建库流...
顾名思义,就是不需要PCR的建库过程。其文库构建的核心步骤为:基因组打断-末端修饰-加接头-文库质控。但事实上,这只能算是建库环节的PCR-Free。真正的PCR-Free,应该是从建库到测序全流程均无文库扩增的过程(例如单分子测序技术)或者无PCR扩增错误累积的测序技术(例如MGI的DNBseq)。 图1:常规建库与PCR-Free建库流程...
1. PCR-Free建库技术: 2. 省去扩增步骤,缩短建库时间; 3. 避免使用高保真聚合酶,降低建库成本; 4. 减少扩增产生的复制错误; 5. 避免扩增偏好性; 6. 避免扩增产生的Duplication,降低测序成本。 llumina DNA PCR-Free Prep,Tagmentation DNA建库即运用了PCR-free的建库方式,并同时采用创新型链接在磁珠上的转座酶...
PCR-free建库是指文库的准备截止在接头连接磁珠纯化后,不需要PCR扩增的建库过程。即在建库到测序全流程均无文库扩增的过程或者无PCR扩增错误积累的测序技术,在NIPT、NIPT-PLUS和CNV-seq等检测项目中能有助于临床完成精准的检测,避免由PCR扩增引入的错误,但需要较大起始DNA投入量。 通常来讲,一些具有复杂的二级结构、...
PCR-Free建库技术: 省去扩增步骤,缩短建库时间; 避免使用高保真聚合酶,降低建库成本; 减少扩增产生的复制错误; 避免扩增偏好性; 避免扩增产生的Duplication,降低测序成本。 llumina DNA PCR-Free Prep,Tagmentation DNA建库即运用了PCR-free的建库方式,并同时采用创新型链接在磁珠上的转座酶(BLT),将接头连接和DNA 片...
PCR-Free技术原理 基于华大智造DNBSEQ平台的PCR-Free技术,在建库和测序过程中均没有PCR错误,将无扩增错误的PCR-Free单链环状文库建库方法与无拷贝错误累积的DNB制备方法结合起来,可以全面覆盖基因组的复杂区域,检测更精准,能够有效避免PCR扩增引入的碱基错配和偏向性。基于该技术,华大智造现已推出MGIEasy™ PCR-Free...
其实当你了解之后才发现,PCR建库只是因为技术受限之下的不得已所为。就像上班一样,不是说多想上班,只是为了挣钱不得不上班而已。 pcr建库的优点就一个,就是放大荧光信号,提高信噪比,让测序测得更准一点。因为如果文库浓度很低,测序仪就不能捕获到很明确的荧光信号,那测序质量也就低。而且如果是混样同时测序,一个...
由于建库过程中去除了PCR扩增步骤,利用MGIEasy PCR-Free DNA文库制备试剂套装获得的文库(简称MGI WGS PCR-Free文库)无PCR引入的错误或者bias。结合MGI DNBSEQTM测序技术利用滚环复制进行DNA纳米球(测序模板)的制备(原理如图1所示),可以避免基于PCR指数扩增引入的测序错误累积,最大限度的保证基因组的真实性。
大会上,蔡悦博士提出来PCR-free建库+DNBSEQ™测序技术的“0”PCR测序解决方案,可以更准确、全面的检测基因组变异。 2019年8月23日-25日,2019全球华人遗传学大会在上海复旦大学盛大举行,华大科技产品总监蔡悦博士受大会邀请,带来了题为《更全面、准确的基因组变异检测新方案》的精彩报告,为基因组变异研究带来了全新的...
BGISEQ平台PCR-free重测序实现了建库和测序过程的真PCR-free。如图1所示,对于I平台,测序过程必须通过桥式PCR扩增获得分子簇(cluster),才能达到放大检测信号的目的,即使是PCR-free建库(图2),在建库测序过程中最少也要有一步PCR。 而基于DNBSEQ™技术的BGISEQ测序平台,如果采用PCR-free建库(图3),那么可以保证建库过程...