PCR原理：DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链，在DNA聚合酶的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步...
PCR由变性--退火(复性)--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至90~95℃一定时 间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至50~60℃,引物与模板DNA单链的互补序...
1. PCR引物设计的目的是在扩增特异性和扩增效率间取得平衡。() 2. 在PCR反应中,dATP在DNA扩增中可以提供能量,同时作为DNA合成的原料。() 3. DNA扩增过程未加解旋酶,可以通过先适当加温的方法破坏氢键,使模板DNA解旋。() 4. PCR反应中,复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成。() 5. PCR...
它们是科学家根据模板DNA的特定序列人工合成的。这就像是盖房子时,先打下的几个关键的小桩子,用来确定从哪里开始盖。 作用和效果:引物的作用可大了。它能与模板DNA结合,告诉聚合酶从哪里开始合成新的DNA链。就像给导航仪设定了起点一样。在我朋友的实验中,如果引物设计得不好,比如长度不合适或者和模板DNA的匹配度...
荧光定量PCR原理: 荧光定量PCR最早称TaqMan PCR,后来也叫Real-Time PCR,是美国PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术。该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针或相应的荧光染料来实现其定量功能的。其原理:随着PCR反应的进行,PCR反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收...
能与P基因模板链3′端的一段碱基序列互补配对的短单链核酸5′端引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸,因此设计扩增P基因的引物,需要两种引物分别与两条模板链3′端的碱基序列互补。DNA聚合酶延伸时,是将脱氧核苷酸加到引物的3′端,为了不破坏目的基因,该限制酶识别序列应添加在引物的5...
PCR法DNA探针标记试剂盒 原理及特点 PCR 标记的原理是用带标记的 dNTP 进行 PCR,*得到的 PCR 产物 将带有标记,可以直接用于杂交试验。本产品就是基于上述原理的基础上开 发,它具有下列特点: 1. 一站式,本试剂盒提供经过优化的试剂,不需要用户自己摸索。
DNA序列为SEQ ID NO.11的100μmol/L的通用上游引物0.75μL; DNA序列为SEQ ID NO.12的100μmol/L的通用下游引物0.75μL; DNA序列为SEQ ID NO.13的10μmol/L的BTV-2特异性嵌合上游引物0.4μL; DNA序列为SEQ ID NO.14的10μmol/L的BTV-2特异性嵌合下游引物0.4μL; DNA序列为SEQ ID NO.15的10μmol...
7. DNA 热循环仪(PCR 仪):如普通 PCR 仪、梯度 PCR 仪、荧光 PCR 仪等,用于核酸的扩增,可进 行定性和定量检测。 8. 凝胶成像系统:用于电泳结果的观察、拍照和分析。 9. 核酸蛋白分析仪:通过核酸和蛋白在紫外 260nm 和 280nm 有不同吸收峰的特性,用于核酸和蛋白的定量检测及提取的 DNA 纯度的检测。
芯片胶束电动毛细管电泳胶束电动毛细管电泳是毛细管电泳与胶束增溶色谱相结合的分离技术,其原理是在装有胶束溶液的通道内,溶质组分在电场力的作用下根据其在胶束相和水相之问的分配不同而产生分离。Jin等在玻璃芯片上采用胶束电动色谱的分离模式,以Bio-Rad公司的CE·SDS缓冲液作为分离介质,成功实现了相...