共5ml分装成200µl/每管(可应用于50-100ml培养瓶内的细胞裂解) 细胞裂解液: 组织裂解液配方: 7 mol/L 尿素、 7M Urea(60. 06) 4.2042 g 2 mol/L硫脲、 2M thiourea(76.12) 1.5224 g 2% NP-40、 2%(v/v) NP-40 0.2 ml 1% Triton X-100、 1%(v/v) Triton X-100 0.1 ml 65 mmol/L DTT...
1. 融解 NP-40 裂解液,混匀。取适量的裂解液,在使用前数分钟内加入 PMSF,使 PMSF 的最终浓度为 1 mM。 2. 对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150 - 250 μl裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充...
western blotting的Lysis buffer，是裂解细胞提取蛋白用的裂解液.SDS是十二烷基硫酸钠，RIPA裂解液组成： 50 mM Tris-HCl (pH 7.4，三羟甲基氨基甲烷-盐酸), 150 mM NaCl, 1% NP-40,0.1% SDS（不同公司的配比不同，有用Tris-hcl PH=8.0的，加0.5%的去氧胆酸钠）NP-40（Tergitol-type ）...
1. 裂解液制备: 每1 ml冷的NP-40裂解液中加入2 μl蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。 2. 取5-10×106个细胞,在4℃,1000×g条件下离心5-10分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞。 3. 用冷PBS洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
在700mL/L酒精洗涤一次后加入200mLTE.然后再加入RNA酶(最终浓度为50mL/L),37℃下过夜.然后在101.3DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡1×106细胞在含50μg/ml顺铂的培养液中培养12h,离心沉淀后,加入细胞裂解液(1%NP40,20mmol/LEDTApH8.0,50mmol/LTris-clpH7.5),离心取上清加入10%SDS、蛋白酶K,50℃孵育2h,再...
用该裂解液裂解得到的蛋白样品,可用BCA或Bradford法测定蛋白浓度。实验流程试剂准备:取适量的裂解液,在使用前加入相应量的蛋白酶抑制剂cocktail(WB037)或磷酸酶抑制剂cocktail(WB035)。一.贴壁细胞:1.弃培养基,用预冷的PBS洗涤细胞两次,将培养皿置于冰上;2.在100mm平皿中,加入1ml预冷的裂解液(4℃),对于其他...
勘误一下，NP-40是一种表面活性剂，并不是配方名字哈。NP-40是常用于裂解细胞病毒的表活，CAS 9016-...
我看了一下碧云天，100ml的NP40裂解液211元。RIPA也是差不多的价格。博奥森的成品是180元/100ml （注...
最近老师给了个粗提膜蛋白的方法，先是利用裂解液NP-40 1%，50mM tris-hcl，150nM Nacl，裂解细胞（...