在IMAC中,一个Ni2+有六个配位位点,被含有3,4或5个电子供体基团(配位位点)的螯合物固定在吸附剂上,而剩下未被占据的位点暴露于溶液中,能与组氨酸,半胱氨酸,和色氨酸的侧链或组氨酸标签的蛋白特异性结合。IMAC的螯合配基,常见有IDA(亚氨基二乙酸),NTA(次氮基三乙酸),TED(羧甲基乙二胺等,分别拥...
镍NTA亲和层析介质(Ni-NTA )具有特异性好、流速快的优点,颗粒粒度均匀,粒径小,并且螯合镍更稳定,能耐受更高的还原剂,物理和化学稳定性好,批次重复性好。本产品已经螯合好镍离子,使用更方便。 二、 性能参数: 特点 基团密度高,载量大,分辨率高,使用方便 基质 6%的交联琼脂糖凝胶 配体 Ni2+ 配体密度 20-40...
半胱氨酸和色氨酸也能与固定金属离子结合,但这种结合力要远小于组氨酸残基与金属离子的结合力。 镍NTA亲和层析介质(Ni-NTA )具有特异性好、流速快的优点,颗粒粒度均匀,粒径小,并且螯合镍更稳定,能耐受更高的还原剂,物理和化学稳定性好,批次重复性好。本产品已经螯合好镍离子,使用更方便。 二、 性能参数: 三、...
镍离子金属螯合亲和层析介质最经典的配体是IDA。镍离子有六个螯合价数,Ni-IDA螯合了三价,剩余三价;而Ni-NTA螯合四价,剩余两价,因此Ni-IDA琼脂糖凝胶作用力要比Ni-NTA琼脂糖凝胶的强。也正因为这个原因,在同样条件下Ni-IDA洗杂质和目标蛋白的要比Ni-NTA的咪唑浓度高,但是NTA的填料更稳定,耐受更强的还原剂,更...
Ni-NTA琼脂糖纯化树脂,以6%交联的琼脂糖为基质,通过化学方法与四配位的氮川三乙酸(NTA)螯合镍离子(Ni2+),从而得到更加稳定的纯化树脂。该树脂专为纯化组氨酸标签的蛋白而设计,适用于各种表达来源,如大肠杆菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞。在重组蛋白表达后,可以利用变性或非变性条件对目的蛋白进行纯化,并...
Ni-NTA琼脂糖纯化树脂是以6%交联的琼脂糖为基质,通过化学方法偶联了四配位的氮川三乙酸(NTA)螯合镍离子(Ni2+ ) 后的产品, 更加稳定,可以纯化组氨酸标签的蛋白。 Ni-NTA 树脂可以用于各种表达来源(如大肠杆菌、酵母、 昆虫细胞和 哺乳动物细胞)的组氨酸标签蛋白的纯化。 在含组氨酸标签的重组蛋白表达后,可以利用变...
NI-NTA蛋白提纯的原理如下: Ni柱中的氯化镍或者硫酸镍可以与有HIs(组蛋白)标签的碱性蛋白蛋白结合,组蛋白标签一般是6个组氨酸(碱性氨基酸)。在蛋白上样后,带有组氨酸标签的蛋白特异性结合到柱子里,其他的杂蛋白流出。Ni柱中的氯化镍或者硫酸镍可以也可以与咪唑结合这时候再用咪唑洗脱,梯度洗脱,咪唑竞争性结合到硫酸...
1、镇离子金属鳌合亲和层析介质(Ni-NTA)说明书简介金属螯合亲和层析介质,又称固定金属离子亲和色谱,其原理是利用蛋白质表面的一些氨基酸,如组氨酸能与多种过渡金属离子如C:,Zn2+,Ni2+,C(T,Fe3+发生特殊的相互作用,能够吸附富含这类氨基酸的蛋白质,从而达到分离纯化的目的。因此,偶联这些金属离子的琼脂糖凝胶就能...
Ni-NTA琼脂糖纯化树脂是以6%交联的琼脂糖为基质,通过化学方法偶联了四配位的氮川三乙酸(NTA)螯合镍离子(Ni2+)后的产品,更加稳定,可以纯化组氨酸标签的蛋白。Ni-NTA树脂可以用于各种表达来源(如大肠杆菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞)的组氨酸标签蛋白的纯化。在含组氨...
Ni-NTA 镍柱简介 Ni-NTA His-Tag 纯化琼脂糖由次氮基三乙酸 (NTA) 螯合剂激活的琼脂糖珠组成,随后加入二价镍 (Ni2+)由四个配位点组成。 亲和层析纯化试剂具有低Ni2+渗漏、高蛋白结合能力和稳定性,并与多种化学品和 pH 值兼容,使其成为高效纯化大肠杆菌、酵母、昆虫和哺乳动物表达系统中表达的聚组*酸标记...