镍NTA亲和层析介质(Ni-NTA )具有特异性好、流速快的优点,颗粒粒度均匀,粒径小,并且螯合镍更稳定,能耐受更高的还原剂,物理和化学稳定性好,批次重复性好。本产品已经螯合好镍离子,使用更方便。 二、性能参数: 特点基团密度高,载量大,分辨率高,使用方便 基质6%的交联琼脂糖凝胶 配体Ni2+ 配体密度20-40μmol /...
镍离子金属螯合亲和层析介质最经典的配体是IDA。镍离子有六个螯合价数,Ni-IDA螯合了三价,剩余三价;而Ni-NTA螯合四价,剩余两价,因此Ni-IDA琼脂糖凝胶作用力要比Ni-NTA琼脂糖凝胶的强。也正因为这个原因,在同样条件下Ni-IDA洗杂质和目标蛋白的要比Ni-NTA的咪唑浓度高,但是NTA的填料更稳定,耐受更强的还原剂,更...
镍离子氮川三乙酸 镍离子氮川三乙酸(简称NiNTA)是一种用于亲和层析分离的化学试剂。它具有以下特点: 1.高亲和力:NiNTA与含有His标记的蛋白质结合的亲和力非常高。这是因为NiNTA中含有镍离子,而His标记通常是蛋白质表面具有易于与镍离子结合的组氨酸残基。因此,NiNTA可以高效地捕获His标记的蛋白质。 2.可重复使用:...
半胱氨酸和色氨酸也能与固定金属离子结合,但这种结合力要远小于组氨酸残基与金属离子的结合力。 镍NTA亲和层析介质(Ni-NTA )具有特异性好、流速快的优点,颗粒粒度均匀,粒径小,并且螯合镍更稳定,能耐受更高的还原剂,物理和化学稳定性好,批次重复性好。本产品已经螯合好镍离子,使用更方便。 二、 性能参数: 三、...
镍离子金属鳌合亲和层析介质(NiNTA)说明.pdf,镍离子金属鳌合亲和层析介质(Ni-NTA )说明书 一、 简介 金属螯合亲和层析介质,又称固定金属离子亲和色谱,其原理是利用蛋白质表面的一些氨 2+ 2+ 2+ 2+ 3+ 基酸,如组氨酸能与多种过渡金属离子如Cu ,Zn ,Ni ,Co ,Fe 发生
在IMAC中,一个Ni2+有六个配位位点,被含有3,4或5个电子供体基团(配位位点)的螯合物固定在吸附剂上,而剩下未被占据的位点暴露于溶液中,能与组氨酸,半胱氨酸,和色氨酸的侧链或组氨酸标签的蛋白特异性结合。IMAC的螯合配基,常见有IDA(亚氨基二乙酸),NTA(次氮基三乙酸),TED(羧甲基乙二胺等,分别...
纯泰特殊结构设计的镍离子金属螯合亲和层析介质包括Ni-NTA 和Ni-IDA 两种配体,既具有特异性好、螯合镍更稳定,镍离子脱落少,使用寿命 2、长的优势,同时具有基础层析介质颗粒粒度均匀,流速快的优点,并且物理和化学稳定性好,能耐受更高浓度的还原剂、变性剂和去垢剂,批次重复性好,质量稳定。本产品已经螯合好镍离子,...
Ni-NTA琼脂糖纯化树脂,以6%交联的琼脂糖为基质,通过化学方法与四配位的氮川三乙酸(NTA)螯合镍离子(Ni2+),从而得到更加稳定的纯化树脂。该树脂专为纯化组氨酸标签的蛋白而设计,适用于各种表达来源,如大肠杆菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞。在重组蛋白表达后,可以利用变性或非变性条件对目的蛋白进行纯化,并...
Ni-NTA常见问题及建议Ni-NTA常见问题及建议 纯化的组分中没有His标签的蛋白? 首先确定是蛋白没有挂上柱还是蛋白没有被洗脱下来。若His标签蛋白没有与柱结合: 可能原因:超声的功率不对(太大,蛋白炭化,太小,蛋白没有释放) 策略:改变超声功率,并在超声前加入溶菌酶 可能原因:样品或者是结合缓冲液不正确: 策略:...
NI-NTA蛋白提纯的原理如下: Ni柱中的氯化镍或者硫酸镍可以与有HIs(组蛋白)标签的碱性蛋白蛋白结合,组蛋白标签一般是6个组氨酸(碱性氨基酸)。在蛋白上样后,带有组氨酸标签的蛋白特异性结合到柱子里,其他的杂蛋白流出。Ni柱中的氯化镍或者硫酸镍可以也可以与咪唑结合这时候再用咪唑洗脱,梯度洗脱,咪唑竞争性结合到硫酸...