目前,研究小分子药物与蛋白相互作用的常见的技术包括:CETSA、DARTS、小分子Pull-Down等,这些技术主要局限于定性检测小分子药物与蛋白之间的相互作用,无法定量分析结合的强弱,流程复杂、稳定性差且可能存在假阳性或假阴性的问题。 相比之下,微量热泳动技术(MicroScale Thermophoresis, MST)能精确测定药物与蛋白的亲和力,稳...
MST家族蛋白是一类重要的信号转导分子,参与了多种生物学过程,包括细胞增殖、凋亡、细胞极性和细胞迁移等。MST蛋白互作对于细胞的正常生理功能和疾病的发生发展都具有重要的影响。 MST家族蛋白是一类酪氨酸激酶,包括MST1和MST2两种亚型。它们在细胞内发挥着重要的调节作用,参与了多种信号通路的调控。MST1和MST2的结构...
首先，作者通过小鼠相关实验发现：肿瘤细胞产生的乳酸是细胞内一种自然存在的 p53 抑制分子，并通过全基因组 CRISPR 筛选确定了AARS1是肿瘤细胞中全局赖氨酸乳酸化的介质。为了验证 AARS1 蛋白与乳酸 (Lactate) 之间存在相互作用，作者采用 MST (微量热泳动技术)证实 AARS1 蛋白 (EcAlaRS细菌酶、HsAlaRS 人源酶)...
一 研究膜蛋白分子互作面临的问题 膜蛋白的纯化过程中面临着不稳定、丰度低、难纯化等问题,无法得到高质量和纯度好的膜蛋白开展体外分子互作实验。但是,利用免纯化微量热泳动(Microscale Thermophoresis, MST)技术,可以构建 GFP/YFP 等荧光融合蛋白,采用裂解液直接进行免纯化 MST 实验,从而检测蛋白与分子间相互作用。
然而一些蛋白很难纯化,如膜蛋白等,还有一些蛋白因为不稳定/丰度低/难纯化等问题,无法得到高质量和纯度好的蛋白开展体外分子互作实验。但是,利用免纯化微量热泳动 (Microscale Thermophoresis, MST) 技术,对于难以纯化的蛋白可以构建 GFP 等荧光融合蛋白,采用细胞裂解液直接进行 MST 实验,从而检测蛋白与分子间相互作用...
这种技术基于蛋白质在溶液中的扩散速率来测量蛋白质之间的互作。MST蛋白互作技术具有高灵敏度、高特异性、无需标记等优点,可以广泛应用于药物发现、蛋白质结构和功能研究等领域。该技术已经被广泛应用于多种蛋白质之间的相互作用研究,为解析蛋白质互作网络提供了有力的手段。
检测，从而可以在不需要纯化目标蛋白的情况下完成分子互作检测。二 免纯化 MST 技术操作步骤(HEK293T 细胞的瞬时表达技术为例)(图1)1. 构建目的蛋白与 GFP 蛋白融合质粒。2. 按照常规步骤进行 HEK293T 细胞的复苏、传代及质粒的瞬转。3. HEK293T 细胞经过培养60-72h后过程中，在荧光显微镜下观察 GFP 蛋白的...
MST蛋白与Sav1的互作 Sav1是MST蛋白最重要的结合伴侣之一,它能够通过结合MST蛋白的N端区域来激活MST蛋白的激酶活性。研究表明,Sav1与MST蛋白的结合是必须的,否则MST蛋白的激酶活性将被抑制。此外,Sav1还能够调控MST蛋白的亚细胞定位,使其在细胞中定位于细胞质或核区域。 MST蛋白与Lats1/2的互作 Lats1/2是MST蛋白...
蛋白聚集体标记 MST技术检测分子互作时,需要对蛋白聚集体进行荧光标记。通常外源标记的方式有三种:氨基标记、His-tag标记、半胱氨酸标记。 研究人员将α-syn蛋白122位的天冬酰胺突变为半胱氨酸后,使用染料标记蛋白单体,随后将标记好的单体与未标记的野生型单体按照不同比例混合后再进行纤维生长。最终确定在标记蛋白比例...
@重庆慧算新材料技术有限公司mst蛋白互作 重庆慧算新材料技术有限公司 MST蛋白互作的分析通常涉及到分子动力学模拟和结构预测。我们提供的模拟计算服务可以支持这类研究,帮助用户更好地理解蛋白质之间的相互作用机制。通过高精度的计算模型,能够获得更准确的互作数据,为后续实验设计提供参考。