方法 (1)细胞增殖及粘附能力采用MTT法检测;(2)细胞侵袭和迁移能力采用Transwell小室模型检测;(3)Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4),髓样分化因子88(myeloid differentiation factor,MyD88)及核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)的蛋白和mRNA表达水平分别采用Western blot和RT-PCR测定.结果 (1)LPS(浓度...
TE-1和EC18细胞在感染具核梭杆菌或溶血孪生球菌24 h后进行蛋白提取和BCA定量,根据BCA定量结果进行上样,通过SDS-PAGE分离等量的总蛋白,电转移PVDF膜上,并在4 ℃下与一抗TLR4(1∶1 000)、MYD88(1∶1 000)、C-myc(1∶1 000)...
脂多糖(LPS)信号传导以TLR4为媒介的信号转导途径。通过配体结合形成的细胞内信号转导途径就和IL-1受体是一样的，具体情况如下。首先，当脂多糖与TLR4结合时，其会通过衔接蛋白-髓样分化因子88（英文名：Myeloid Differentiation Protein-88、MyD88）激活丝氨酸/苏氨酸激酶这种IL-1受体相关激酶（英文名：IL-1 Recepto...
3.4 TLR4/MyD88/NLRP3/Caspase-1信号通路在GCPVO改善LPS诱导的炎症中的作用 TLR4是LPS的受体,在先天免疫中起着重要的作用,TLR4的激活招募细胞内含有TIR结构域的接头蛋白MyD88,促进炎症因子的产生,激活NF-κB信号通路,导致多种炎症因子...
LPS因此也常用作NF-κB信号通路的激活剂。另外,LPS在肝细胞中可以上调iNOS的水平。市场上的大多数LPS制剂往往会被其他的细菌成分所污染,例如脂蛋白,因此在激活TLR4信号通路的同时也会激活TLR2信号通路。本超纯LPS产品是采用连续酶解步骤提取、分离,并通过苯酚-三乙胺-脱盐胆酸钠抽提纯化获得的超纯品,仅激活TLR4信号...
LPS 作用的分子和细胞机制:细菌入侵人体释放 LPS 后,LPS 先与 LPS 结合蛋白(LBP)结合,再被转运至免疫细胞表面,与膜蛋白 CD14 结合,随后转移至 Toll 样受体 4(TLR4)和髓样分化蛋白 2(MD2)形成复合物。该复合物激活髓样分化因子 88(MyD88)等信号分子,经一系列生化过程激活转录因子核因子 κB(NF-κB),使其...
目的体外实验探讨细胞色素P4504X1(CYP4X1)在炎性环境下的表达情况及其分子机制。方法人胶质瘤细胞系U251细胞分别给予细菌脂多糖(LPS)联用Toll样受体4(TLR4)抑制剂CLI-095或髓样分化因子(MyD88)的抑制剂ST2825处理24h,采用qRT-PCR法检测U251细胞CYP4X1和过氧化物酶
(a)血清LPS水平(n = 10);(b)基于western blot检测肝脏TLR4、NF-κb(p65)和TNF–α的蛋白表达情况(n = 3);(c)采用RT-qPCR技术对TLR4通路中相关基因(MyD88、IRAK4以及TRAF6)相对表达量进行评估(n = 3);(d)采用RT–qPCR技术检测肝脏中促炎基因TNF-α、NF-κB(p65)和IL-1β以及趋化因子基因MCP-1的...
由LBP和CD14促进的LPS识别由TLR4和MD-2受体复合物介导。TLR4信号的激活分为MyD88依赖性、MYD1988非依赖性和TRIF依赖性途径,介导促炎症细胞因子(TNF-α、IL-6等)和I型干扰素基因的激活。IL,白细胞介素;LBP,LPS结合蛋白;脂多糖;MD-2,髓样分化-2;MyD88,髓样分化因子88;TLR4,toll样受体4;TRIF,含有适配器的Tol...
激活NF-κB通路:LPS可通过TLR4触发MyD88依赖性信号,导致NF-κB核转位,调控炎症基因转录; 激活MAPK通路:LPS可诱导JNK、ERK、p38磷酸化,调控细胞增殖、凋亡或分化; 炎症小体激活:高浓度LPS可激活NLRP3炎症小体,促进IL-1β的成熟释放; 成功案例:AbMole的LPS(脂多糖,Lipopolysaccharides,M9524)被科研人员用于激活NF-κB...