在降解过程中,位于⾃噬溶酶体外膜的LC3-II被半胱氨酸蛋⽩酶Atg4B移除后回收,位于内膜的LC3-II则与包裹的内容物⼀起,被溶酶体降解。图1:⾃噬信号通路的调控,点击下载源⽂件 LC3A/B/C有种属细胞/组织分布特点 LC3/Atg8 被具有蛋⽩内切酶活性的Atg4在羧基端剪切,⽣成胞质 LC3-I。LC3-I通过...
在降解过程中,位于自噬溶酶体外膜的LC3II被半胱氨酸蛋白酶Atg4B移除后回收,位于内膜的LC3II则与包裹的内容物一起,被溶酶体降解。LC3是自噬标志物,自噬形成时,胞浆型LC3即LC3I会酶解掉一小段多肽,转变为自噬体膜型即LC3II,LC3III比值的大小可估计自噬水平的高低。
师兄不厌其烦的给我解释到:在自噬过程中,LC3-I逐渐转变为脂质化的LC3-II,当自噬的程度比较高时,LC3-I的量是较低的。当LC3-I和LC3-II总量恒定时,LC3-II/LC3-I用来表示自噬的水平。其次,与LC3-II相比,LC3-I对反复冻融更加敏感,更容易降解,因此一般需要用新鲜制备样品上样。这点倒是有可能,之前制好的样本...
LC3-II 的分子量大于LC3-I,分子间存在极强的疏水作用力,SDS-PAGE 电泳时LC3-II 涌动的速度比LC3-I 快,所以可以检测到两条带,上面的条带为LC3-I,下面的条带为LC3-II,典型的western 结果如下:通过western blot 检测ATG12-ATG5 和LC3 的水平,判断机体的自噬现象。3Weste...
LC3-I的分子量约16KD,由于LC3-II接合了PE基团,所以理论上,LC3-II的分子量比LC3-I更高。但是,由于带负电的PE改变了LC-II的性质,使其疏水性更强,导致其在电泳中迁移率更高,所以,LC3-II在电泳后,停留在了更小分子量(约14KD)处。 小分子量、LC3-I与LC3-II仅有2KD差异,在WB中需注意: ...
lc3b与lc3ii区别:含义不同,性质不同。一、含义不同:LC3合成之后是前提LC3pro-LC3;立刻C末端被ATG4水解切割掉一段多肽,暴露甘氨酸,这个是LC3-I,胞浆分布。二、性质不同:自噬过程中,LC3-I在ATG7和ATG12-ATG5-ATG16L作用下(和泛素修饰过程很像),与磷脂酰乙醇胺共价结合,这个才是LC3-II...
结果如下图所示,HTRF LC3B-II Detection Kit和Western Blot结果具有可比性且高度相关。 HTRF/WB相关性验证 近单倍体细胞HAP1 KO实验结果证实,HTRF LC3B-II Detection Kit 对LC3B-II的检测具有高度特异性和选择性。 HTRF LC3B-II 特异性验证 WB平行实验数据...
一分钟带你了解wb实验-WB常见问题及注意事项 WB常见问题及注意事项 一、蛋白样本制备1、蛋白质的样品制备是Western Blot的第一步,WB待测组织净重与裂解液的体积比例为1g:10ml。同时,还应注意以下问题: (1)在合适的条件下,保持蛋… 医学小丽 干WB实验的6点经验 华仁医学科技 这些WB实验小细节你注意到了吗? WB...
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